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Studies on vibrio parahaemolyticus by PCR during the four seasons in the south coast of taiwan 指導老師:張福林副教授 研究生:陳念群 Introduction 致病三大弧菌 V.vulnificus V.cholerae V. parahaemolyticus 霍 亂 弧 菌 與 腸 炎 弧 菌 是 食 品 界 及 防 疫 單 位 最 重 視 的 食 品 中 毒 菌 (資料來源:行政院衛生署) TCBS V. parahaemolyticus : 直徑1~2mm、有光澤、綠色 V. cholerae : 直徑2~4mm 、平滑、黃色、中心不透明、周圍透明 嗜鹽性試驗(0% 、 1% 、 6% 、 8% 、 10%) V. parahaemolyticus : 6% 、 8%生長良好 V. cholerae : 0% 、 1%生長良好 Vibrio parahaemolyticus is one of the most important food-borne pathogens in Taiwan, Japan and other coastal countries. Vibrio parahaemolyticus is a gram-negative, halophilic bacterium that occurs naturally in estuarine environments world-wide. (Environmental Microbiology 5(8),706-710 ,2003 ) Thermostable direct hemolysin (TDH) TDH/ TDH-related haemolysin (TRH) Urease positive Lethal toxin 附著因子 Pathogenic V.parahaemolyticus generally produces a thermostable direct hemolysin (TDH). More than 90% of clinical V.parahaemolyticus isolates, but fewer than 1% of food or environmental strains produce TDH. (APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, Mar. 2003) 橫跨四季有系統地蒐集﹑保存與研究台灣南部海域中的腸炎弧菌，並且進行一些基本特性分析，進而由分析結果來評估腸炎弧菌在台灣南部海域的分佈情形，而最後再來加以更深入的探討。 研究架構 採樣地點 安平漁港 興達漁港 前鎮漁港 採樣方法 水樣:利用採樣筒丟入海水中採得水樣後放入無菌塑膠試管中 有機物質:刮取岸邊岩石上的藻類、貝類或水中魚類後放入無菌塑膠試管中 保存於室溫3小時內帶回實驗室分析 水質測量 PH (METTLER TOLEDO) 比重 鹽度 溫度 (VWR 1551-004) 透視度 濁度 (HACH 46500-00) 綜合水質DO、TDS、 EC (DR/2500 Prot HACH5900) COD (HACH COD Reactor) 、 (HACH ODYSSEY) Sample collection (3水樣3有機樣本) APW 每管APW各取1loop接種於TCBS 抽取DNA 挑選典型綠色菌落分別各接種於TSB-2及TSA-2 PCR(toxR) 由TSB-2 抽取DNA