高效液相色谱测定水果中的灭螨醌和羟基灭螨醌.pdf

高效液相色谱测定水果中的灭螨醌和羟基灭螨醌 蒋小良 江门出入境检验检疫局，广东江门 529000 摘要 建立了水果中农药灭螨醌和代谢产物羟基灭螨醌的高效液相色谱法测定方法。样品经过正己 烷/ 乙酸乙酯（1:1）提取后，过石墨化碳氨基复合小柱净化，然后用高效液相色谱-荧光检测器法进 行检测。结果表明，灭螨醌和羟基灭螨醌在0.01~5.0 mg/L 范围内均呈现良好的线性关系，相关系数 均大于0.999 。样品加标回收率为88.5%~102.3%，测定结果的相对标准偏差均小于3.35% （n=5 ）。 该方法具有灵敏度高和准确度高等优点，可满足于水果中灭螨醌和羟基灭螨醌含量的测定要求。 关键词 灭螨醌；羟基灭螨醌；高效液相色谱；水果 灭螨醌是一种重要的合成杀螨剂农药，是用来控制虱类、螨类和其它无脊椎动物的杀虫剂，它 的代谢产物为羟基灭螨醌。作为一种触杀性杀螨剂．无内吸活性，广泛用于果树如梨、桃、柑橘、 黄瓜、蔬菜、葡萄防治螨类危害、由于它具有高效、低毒、广谱和生物降解性等特性，在国际上广 泛使用。按照我国农药毒性分级标准，灭螨醌属于低毒农药，对大鼠LD50 为5000mg/kg[1] 。欧盟、 日本、加拿大及美国等国家地区对水果中灭螨醌残留量都有严格的限量标准，最大残留量（MRLs ） 为灭螨醌及其羟基灭螨醌的混合残留总量。欧盟[2]规定了苹果和梨中灭螨醌MRLs 为0.1mg/kg，橙 子为0.4 mg/kg；美国规定葡萄中灭螨醌的MRLs 为1.6 mg/kg；日本“肯定列表”对梨和苹果中灭螨醌 的MRLs 分别为2 mg/kg 和1 mg/kg。由于羟基灭螨醌仍然保留了与灭螨醌基本相同的萘醌结构，被 同样认为对血液凝固会产生影响，因此对植物及动物性食品中的灭螨醌进行风险评估及残留检测时， 除了灭螨醌，还应包括羟基灭螨醌[3] 。 蔬菜水果中的农药残留是国内外研究热点[4-6] [7,8] ，检测方法主要有高效液相色谱法 、高效液相 色谱-质谱法[9,10]及气相色谱-质谱法[11-13] 。国外对灭螨醌检测的相关研究很少，主要集中在水果和蔬 菜中[14,15] ，我国至今没有相关文献报道，也未曾制定国家标准和行业标准。本工作以正己烷/ 乙酸乙 酯为溶剂，用高效液相色谱法检测分析，结合萃取、浓缩、净化、外标定量测定水果中灭螨醌及羟 基灭螨醌的残留量。因此本分析方法的建立，促进提高我国水果中农药残留检测技术水平和标准化 的建立，打破国外技术性贸易壁垒，促进对外贸易的发展等方法起到积极作用，为建立水果中灭螨 醌及其羟基灭螨醌残留量检测标准提高技术支撑和保障。 1 实验部分 1.1 主要仪器与试剂 高效液相色谱仪： LC-20A 型，带二极管阵列检测器，日本岛津公司； 紫外可见分光光度计：2450 型，日本岛津公司； 高速组织捣碎机： BILONJJ-2 型，江苏金坛市亿通电子有限公司； 旋转蒸发仪： R-210 型，瑞士步琦公司； 氮吹仪： 21011V001 R200 型，瑞士步琦公司； 电子天平： TB215D 型，美国丹佛公司； 超纯水系统： Synery UV 型，美国Millipore 公司； 10 灭螨醌： （纯度≥99.9 %，德国Supelco 公司）； 羟基灭螨醌： （纯度≥99.9 %，德国Supelco 公司）； 正己烷、乙酸乙酯： HPLC 级，德国MERCK 公司； 乙腈： HPLC 级，美国Mallinckroat Baker 公司； SPE 柱： Cleanert PestiCarb/NH2 ，500mg/6mL，博纳艾杰尔科技有限公司； 实验室用水为超纯水。 1.2 色谱条件 色谱柱：VP-ODS色谱柱 (250 mm×4.6 mm，10 μm ，日本岛津公司) ；柱温室温