违禁添加降压、降糖类药物化学发光免疫分析方法的建立.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 随着在保健品中违禁添加化学药物的曝光逐渐增多，不法商贩将过量的速效 降压、降糖类化学药物添加到保健品中的真像也逐渐浮出水面，研究表明长期 误服此类化学药物会导致严重的不良后果，甚至危及生命，因此有必要开发快 速、灵敏的检测方法，规范保健品市场，保证人民健康。 目前，降压、降糖类违禁添加药物的分析方法主要为仪器分析，如 HPLC 、 LC/MS 等，仪器分析具有许多应用局限，如仪器昂贵，样品处理复杂，不适合 现场检测，需要专业技术人员。而化学发光免疫分析法由于其灵敏、快速、特 异性等优点，有望成为降压、降糖类保健品现场快速检测的有效手段。 本实验中针对降压类药物卡托普利，降糖类药物瑞格列奈、那格列奈建立 了化学发光免疫分析法。针对卡托普利分子上的巯基，瑞格列奈、那格列奈分 子上的羧基合成了免疫原，得到多克隆抗体，酶联免疫分析法对抗体和包被原 组合进行了筛选，分别得到最优组合，在ELISA 中卡托普利、瑞格列奈、那格 列奈的灵敏度分别为1110.92、40.05 、72.33 ng.mL-1 。 运用控制变量法对化学发光免疫分析法的各个因素进行优化，发现化学发光 免疫分析法明显优于 ELISA ，卡托普利、瑞格列奈、那格列奈的灵敏度和线性 范围分别为193.54ng.mL-1，10.16-3685.54 ng.mL-1、28.58ng.mL-1，1-180ng.mL-1、 4.68 ng.mL-1，0.1-100ng.mL-1，化学发光法的灵敏度相对于酶联免疫法都有所提 高，线性范围更宽。将建立的化学发光法用于检测市售保健品，所得结果与仪 器法一致。总结：本研究为检测降压降糖类违禁添加药物提供了灵敏、快速、 特异性、高效的方法，可用于现场高通量的筛选检测。 关键词：化学发光免疫分析；多克隆抗体；违禁添加药物；瑞格列奈；那格列 奈；卡托普利 I 万方数据 Abstract Abstract The illegal fortification of chemical medicines in natural dietary supplements is a growing concern in most country, especially for antihypertensive andhypoglycemic drugs. Prohibited chemical drugs were added into natural dietaryingredients for the great benefits. Addationally this kind of chemical drugs abused for a long time will result in serious consequences. So it was very necessary to develop effective detection method for detection of antihypertensive and hypoglycemic drugs. To date instrument analysis is the main detection method for antihypertensive and hypoglycemic drugs,