血液生理特性实验教学课件.ppt

计数池与盖玻片高度为0.1mm,中方格边长为0.2mm， 5个中方格容积为0.02mm2。 红细胞数：5个中方格计数的红细胞×稀释倍数 注意事项 1、稀释均匀 2、细胞悬液避免过多或过少 2、各格均匀 血液凝固时间测定(blood clotting time) 目的和要求 学习玻片法测定血液凝固时间 掌握血液凝固的基本原理 血 液 凝 固 途 径 纤溶 抗凝 可以用自身血液或家兔血液 材料和器械 采血针和计时器 实验步骤： 1、消毒指尖后，采血针刺破皮肤，血液自然流出，用玻片接下第一滴血，记录时间。（家兔耳缘静脉采血，或剪切取血滴在玻片上） 2、每隔30秒用针尖挑血一次，直到挑起纤维细丝，时间即为凝血时间。 凝血时间的测定法( 试管法) 取内径8 mm 的试管2 支。用消毒干燥的注射器自兔心脏采血2 ml, 去针头, 将血液沿管壁缓慢注入试管中, 每管1ml, 凝血时间记录自血液进入注射器时开始计时, 每隔30s 将试管倾斜一次, 角度约30 度, 观察血液是否流动。直至试管倾斜到90 度血液不再流动而完全凝固为止, 停止计时, 此即为凝血时间 人体正常值为2-8分钟。 家兔凝血时间：试管法：147-246s 本实验是检测机体的 哪种或哪几种凝血系统，为什么？ 实验报告需要提供的结果： 血沉的数据 红细胞比容的数据 渗透脆性的范围 个人血型 家兔红细胞计数 家兔凝血时间 思考题 分析红细胞脆性的意义 影响血沉的的主要因素 红细胞比容测定时出现误差的原因。 如果有标准A型红细胞和标准B型红细胞，但无标准血清时，能否进行血型鉴定？ 为什么血型相同的人之间输血仍要做交叉配血试验？ ABO血型系统有无母子血型不合导致的新生儿溶血情况。 哪些因素会影响红细胞计数的准确性 说明血液凝固的基本过程 测定凝血时间有什么实际意义 本次实验是检测机体的哪种或哪几种凝血系统。 血液生理实验 家兔红细胞沉降率测定 家兔红细胞渗透脆性测定 家兔红细胞比容测定 人ABO血型的测定 家兔红细胞计数 家兔血液凝固时间测定 一、红细胞沉降率测定 血沉：红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation tate,ESR ） 红细胞膜表面的带有负电荷形成zeta电位，使红细胞互相排斥而保持悬浮稳定性，沉降很慢。 但在病理情况下，血浆纤维蛋白原或球蛋白增多，致使红细胞zeta电位降低，彼此易于沾边成缗钱状，此种聚集的红细胞团块与血液接触的总面积缩小，受到血浆的阻力减弱而使血沉加快 临床意义 非特异性检查 生理性增快：妇女月经血沉略增快，可能与子宫内膜破伤及出血有关，妊娠3个月以上血沉逐渐增快。 病理性增快 ：各种炎症，组织损伤及坏死，恶性肿瘤，各种原因导致的高球蛋白血症 ，贫血： 血沉减慢意义较小，可因红细胞数量明显增多及纤维蛋白原含量严重减低所致见于各种原因所致的脱水血浓缩、真性红细胞增多症和弥漫性血管内凝血等 实验方法 试剂与器材：5%柠檬酸钠，韦氏长管 1、取充分抗凝的血液2ml,吸取至0刻度处。 2、固定于血沉架上，记录时间，自然沉降，1小时后记录血浆层高度。即血沉(mm/h) 家兔：2-7 mm/h 红细胞渗透脆性(osmotic fragility) 2、红细胞渗透脆性测定 红细胞在低渗盐水中，水分透过细胞膜可使红细胞逐渐胀大而破坏。 本试验是测定红细胞对各种浓度的低渗溶液的抵抗力。红细胞对低渗溶液抵抗力与其厚度和膜结构有关，厚度越大，膜面积与体积比值越小，对低渗溶液的抵抗力小，则渗透脆性越高。 1.红细胞脆性增加： 遗传性球形红细胞增多症，自身免疫性溶血性贫血伴球形红细胞增多者。 2.红细胞脆性减低 见于各型海洋性贫血，包括轻型，重型β海洋性贫血及血红蛋白增多病。缺铁性贫血，镰状红细胞贫血以及其它红细胞面积/体积比例增大情况，如肝病等 人： 最大脆性（开始溶血）：0.42%～0.45%氯化钠溶液 最小脆性（完全溶血）：0.28%～0.32%氯化钠溶液 兔： 最大脆性（开始溶血）：0.42%～0.46%氯化钠溶液 最小脆性（完全溶血）：0.34%～0.32%氯化钠溶液 实验步骤 1、制备梯度低渗（注射器抽取NaCl溶液） 试剂 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1% NaCl 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.6 3.6 4.0 蒸馏水 2.8 2.6 2.4 2.2 2.0 1.8 1.4 0.4 浓度% 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.90 1 2、移液枪抽取兔血液50ul,滴入溶液,摇匀.在室温下放置1小时. 3、观察混合液的颜色。（不要晃动） 下层