性腺激素对初情大鼠生殖轴上NKB、GnRH和Kisspeptin表达的影响.pdfVIP

万方数据 摘 要 初情期启动的早与迟直接影响动物的性成熟和以后的繁殖性能，但其机制仍不清 楚。研究表明，在动物初情期发育的调控中，下丘脑促性腺激素释放激素 （gonadotropinreleasinghormone，GnRH）神经元所分泌的GnRH是初情期启动的决 定性因素。一般认为，动物在初情期之前，下丘脑GnRH神经元对性腺类固醇激素的 负反馈作用十分敏感，因而在出生后到初情期前这段时间，下丘脑GnRH 的分泌因受 性腺类固醇激素的作用而一直处于抑制状态，呈现低幅度、低频率的分泌脉冲；初情 期的启动始于下丘脑性腺激素抑制机制的解除，但GnRH神经元上并没有性腺激素受 体，那么，在性腺激素调节GnRH分泌机制中，应该有对性腺激素敏感的其他中间神 经元介导性腺激素对GnRH 的调节作用。近期研究发现，神经激肽B （neurokininB， NKB）和Kisspeptin神经元上均有性腺激素受体的表达，二者均能促进GnRH释放和 NKB Kisspeptin GnRH 初情期启动。因此，探究动物初情期启动中 、 、 和性腺激素受 体间的关系尤为重要。 目前国内外关于NKB、Kisspeptin和GnRH 的研究，多集中于NKB、Kisspeptin 和GnRH在不同物种中枢神经系统上的定位和其与初情期的关系的研究，缺少对其在 生殖轴上整体的定位研究以及对Kisspeptin、NKB和GnRH与性腺激素水平关系的研 究。本试验以皮下埋植性腺激素、卵巢摘除等处理方法，以雌性SD大鼠为研究对象， NKB Kisspeptin GnRH 采用免疫荧光三标技术来观察各个组大鼠生殖轴上 、 和 的分布 情况，运用ImageJ和Image-proplus6.0软件分别计数和测量各组大鼠生殖轴上NKB、 Kisspeptin和GnRH的阳性细胞数和平均荧光强度，并分析其间的关系及变化规律。 同时结合实时荧光定量PCR、酶联免疫和放射性免疫等分析方法，来阐述NKB、 Kisspeptin和GnRH在机体性腺激素水平改变时的变化及其三者间潜在的联系，为进 一步研究NKB、Kisspeptin和GnRH在雌性大鼠生殖功能上的作用及其机制提供科学 的理论依据。 结果显示：（1）E （29±0.71d）、E+P （28±1.53d）、OVX+E （30±0.38d）、 2 2 4 2 OVX+E+NKB（28±1.18d）和OVX+E+P+NKB（28±0.52d）组大鼠均比Oil（43±1.38d） 2 2 4 P0.01 P0.05 2 组大鼠阴门开启的时间显著提前 （ ），且这五组间差异不显著 （ ）。（） NKB主要分布于大鼠下丘脑的弓状核、室旁核和腹内侧核，腺垂体以及卵巢的黄体 细胞、卵泡膜、颗粒细胞和间质细胞上，且不同部位表达的荧光强度存在差异 P0.05 P0.05 （ ）。①大鼠弓状核上的免疫荧光强度显著高于室旁核和腹内侧核 （ ）。 ②卵巢摘除组的大鼠弓状核上NKB 阳性神经元数显著高于E 和E+P 组（P0.05），