应用Dynal磁珠分离大熊猫微卫星标记的研究.docVIP

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2019-07-06 发布于天津
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应用Dynal磁珠分离大熊猫微卫星标记的研究.doc

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Enrichment of Giant Panda Microsatellite Markers Using Dynal Magnet Beads SHEN Fu-Jun1, Phill Watts2, ZHANG Zhi-He1, ZHANG An-Ju1, Stephanie Sanderson3, Steve J. Kemp2，YUE Bi-Song4 (1.Chengdu Research Base of Giant Panda Breeding, Key lab for the Conservation GeneticsReproduction of Sichuan Province, Chengdu 610081, China; 2.The University of Liverpool, Liverpool L 69 7ZB， UK; 3.Chester Zoological Garden, Upton, Chester CH2 1LH UK; Sichuan University, Chengdu 610031, China ) Abstract: The 400-600bp DNA fractions of giant panda containing STR sequences were captured by hybridization with the oligonucleotide probes attached to streptavadin coated magnetic beads (Dynal) . The enriched DNA were ligated into pGEM-T and then transformed into E. coli JM109 competent cells. In total 260 positive clones were identified from 2880 clones in the libraries which were screened byγ-P33 radiolabelled probes. Finally, we got 54 sequences and successfully designed 37 pairs of STR primers for giant panda. The results showed that this method is very efficient to isolate microsatellite markers. Key Words: Dynal magnetic beads; giant panda; enrichment; microsatellite Dynal磁珠富集大熊猫微卫星标记沈富军收稿日期：2004－03－00；修回日期：2004－00－00基金项目：WELCOME TRUST基金(项目编号：023033)、成都市建设基金(项目编号：200302)、成都大熊猫繁育研究基金(项目编号：200406)，国家高技术研究发展计划(863)项目(项目编号：2002AA229081)资助[Supported by WELCOME TRUST(No.023033), the Construction Foundation of Chengdu City (No. 200302), Chengdu Research Foundation of Giant Panda Breeding, the State 863 High Technology RD Project of China (2002AA229081)]*表示并列第一作者收稿日期：2004－03－00；修回日期：2004－00－00 基金项目：WELCOME TRUST基金(项目编号：023033)、成都市建设基金(项目编号：200302)、成都大熊猫繁育研究基金(项目编号：200406)，国家高技术研究发展计划(863)项目(项目编号：2002AA229081)资助[Supported by WELCOME TRUST(No.023033), the Construction Foundation of Chengdu City (No. 200302), Chengdu Research Foundation of Giant Panda Breeding, the State 863 High Technology RD Project of China (2002AA229081)] *表示并列第一作者作者简介：沈富军(1973—)，男，助理研究员，博士，研究方向：动物分子生物学。E-mail:shenfu