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WATERS 制备 HPLC仪器操作规程
1. 操作功能画面说明:
1.1 Set up --- 设定Pump 硬件系统配置.
1.2 Direct --- 等度(Isocratic)操作设定.
FLOW RATE : 流动相流速设定(范围随着硬件规格而定).
COMPOSITION : 流动相调配比例(A+B+C+D=100%).
CURRENT : 目前状态比例.
New : 变更状态比例.
SPARGE : 氦气法脱气装置流量(0-100).
TEMPERATURE : 设定色谱柱加热装置温度(室温-90℃
PRESSURE : 显示系统压力值.
SWITCH : 外接装置之控制开关.
STOP Flow : 停止Pump 流速.
1.3 Operate Method --- 执行梯度(GRADIENT)功能操作.
1.4 Program Method --- 编辑梯度表(Gradient Table).
1.5 Program Table --- 编辑事件表(Event Table).
2. 基本操作说明 (ISOCRATIC):
2.1 打开氦气钢瓶，设定输出压力为50-90psi(使用In-line 脱气机者，请忽略此步骤).
2.2 将溶剂输送塑料管置入溶剂瓶内液面下(请注意输送塑料管之代号)，打开电源开关至ON(1)的位置，出现如下之开机画面:
2.3 按一下 “Set Up” 功能键，即进入Pump Setup 画面.
2.4 移动光标设定欲使用溶剂瓶A,B,C 或D 的氦气法脱气装置开关，使其为“ENABLE”.(按 “1”,Enter ??ENABLE 打开 ; 按 “0”,Enter ?DISABLE
2.5 如果有使用色谱柱加热装置，设定上限温度数值(应低于溶剂沸点).
2.6 设定系统压力上限数值为4000psi.
2.7 按一下 ”Direct” 功能键，即进入ISOCRATIC 画面.
2.8 设定氦气法脱气装置(SPARGE)流量为100，此时可见到溶剂瓶内有气体吹出之状态，维持约30 分钟后，可降低至” 30 ”以节省氦气
2.9 将Pump 中间之参比阀(Reference Valve)扳手往右扳开，设定Pump 流速1.0mL/min ，Enter，启动Pump 流速.
2.10 选择欲使用之某一个溶剂，并设定其Current 比例为100%，然后将10mL 注射针筒转进溶剂抽取阀门(Inlet Manifold Valve)上方之洞口,再将阀门向左旋转至 “DRAW” 之位置，抽出溶剂约10mL 两次，并检视溶剂输送塑料管内确实已完全无气泡存在，抽取完毕后将阀门回转至 “RUN” 之位置,再将注射针筒转开拔出。D r a w i n g O f f E l u e n t
2.11 若有使用其它溶剂瓶，请重复前一步骤直到所有溶剂抽取完毕为止.
2.12 设定Pump 流速15.0mL/min(※请注意! 确认参比阀是往右扳开的)，E n t e r，启动Pump 高流速来排挤管路内之气泡.
2.13 确认溶剂排出是呈连续不间断之状态，然后按一下 “Stop Flow” 相对屏幕功能键，停止Pump 流速，再将溶剂排出阀门(Reference Valve)扳手往左压紧.
2.14 安装色谱柱，设定流速至使用的范围(约1.0-2.0 mL/min)，以及流动相比例(注意: %A+%B+%C+%D=100%)，待系统平衡稳定后，即可开始进样做分析检测.
※ 注意事项:
<1>. 当使用无机盐类流动相后，须以超纯水冲洗，再以甲醇冲洗.
<2>. 若此Pump 是以IEEE-488 联机做计算机控制时，以上之操作条件参数必须在Millennium 计算机软件操作方法内加以储存设定，才得以作有效之控制。
3. 程序化(Gradient)操作方法:
3.1 编辑Gradient 方法表格:
<1>. 按一下 “Program Method” 功能键，即进入PROGRAM GRADIENT 画面.
<2>. 可先按一下 “CLEAR TABLE” 键，清除表格内原设定条件，然后在Gradient表上的Time(洗脱时间)、Flow(流速)、%A,%B,%C,%D(溶剂比例)及Curve(变化曲线)处，逐列输入欲进行之梯度变化.
注: @ INITIAL 为起始的条件.
@ %A+%B+%C+%D 必须等于100%.
@ 每一列在各项输入后，必须按Enter 键.
<3>. 梯度表编辑完成后，按一下 “SAVE” 键，画面上会出现Enter Table Number (1 – 15)输入欲存放之表号，再按Enter 键，画面上会出现Replace with New Table ? 1= Yes 0=
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