柴油污染土壤呼吸测定.ppt

專題報告柴油污染土壤代謝之研究 指導老師：曹俊文 學生：倪佩君 4960N021 前言 自石化工業發展以來，石油製品及其他有機化物，於不當使用過程中，造成嚴重的的土壤汙染問題，本研究是選以柴油為目標汙染物，採用生物復育技術，因符合成本效益，易於維護且對環境影響甚小等之優點。 研究中模擬配置不同柴油汙染濃度 (1%、5%、10%、20%、50%(w/w)) 之土壤，研究目的重點是在探討使用土壤原生微生物進行分解[ (礦化作用(mineralization)或共代謝(cometabolic) ]柴油之情況，以分解過程中所產出之代謝物CO2，計算其CO2(mmole)累積量，於特定之時間內，觀察對柴油分解效率。 例：C16H34 + 24? O2 → 16 CO2 + 17 H2O 文獻回顧 石油為組成複雜之碳氫化合物 以原油煉製石油產品 柴油特性 油品污染土壤之影響 油品將因土壤吸附及重力作用，垂直滲入地面，一旦超過負荷就會移動導致汙染地下水，大部分油滲入土壤後，而會阻礙揮發性碳氫化合物的蒸發散失而造成微生物的毒害，妨礙作物、植物生長及產量，導致當地環境生物態改變。 清除方式 土壤淋洗、電動力分離法、加熱處理理法、固化/安定法…等。 根據美國超級基金(Superfund)所列管場址中，使用之整治技術包括物理、化學和生物方法，其中生物復育技術具有將汙染物去除之能力、易於維護、適用範圍大、符合成本效益等優點。 生物復育 現地及非現地 土耕法、堆肥法、生物反應器法、生物通風、生物濾膜法、生物強化、生物刺激、自然生物處理法或自然衰減、抽取處理法 生物強化/添加(bioaugmentation) 生物通氣法/氣提法(bioventing) 生物刺激(Biostimulation) 影響微生物分解因子 生物因子：細菌及真菌 酸鹼值：中性，稍為改變 pH值都可導致酵素變性進而隨後失去催化活性 。 溫度：大部份土壤微生物嗜溫菌，即分解油品最大生長速率和活性在20°?35 ° C 含水率：50~80%之間，於復育過程土壤有過多或過少的水量會不利於好氧生物，過少會降低污染物揮發。 實驗方法 土壤取自未有污染紀錄之土壤 檢測土壤背景值 前處理：土壤採樣後先除去雜物、石塊等，於晴天狀態下將土壤拿出去風乾約一星期，再拿取2mm篩網過濾未過濾之土塊多次磨碎，重複動作數次已確保取得粒徑均勻之土壤，保存於密封塑膠盒中並每3~4天曝氣攪動土壤一次 柴油汙染土壤呼吸測定 礦化作用其最終產物為CO2，原理為降解基質(substrate)和所產生CO2量成正比，CO2成了最好提供微生物是否降解碳氫化物之潛能資訊，若使用氣相層析(GC)並不一定能測準最終產物(Junior et al.,2009)。因此使用生物分解瓶(Biometer flask) (250ml)藉以來測量微生物於代謝過程中所生產CO2之情況( Pramer Bartha,1965) 。 生物分解瓶 實驗方法 先配置柴油汙染土壤濃度為1%、5%、10%、20%、50%和控制組(w/w)，每一個濃度各做3瓶 調整pH值至7.5、添加(NH4)2HPO4(Dale et al.,?)1%於土壤中。 添加適量蒸餾水於土壤中至土壤含水率為60%。 添加柴油。 呼吸測定(Soil respirometric tests) 受檢體加入瓶內後，將生物分解瓶裝置完成，使用幫浦做曝氣，於過程中氣體通入ascarite過濾，使用注射器(syringe)注入鹼液於側支瓶(side-arm)內，再定期回收將已吸收CO2之鹼液做酸鹼滴定實驗，經計算後得知CO2釋放含量。 植物毒性測試(Plant toxicity test) 配置柴油汙染土壤濃度為1%、5%、10%、20%、50%和空白組(w/w)，空白組不添加柴油，各個污染不同汙染濃度土壤各種植5株紅豆及綠豆做毒性試驗，為期7天收成觀察生長情況。 實驗結果與討論 土壤質地試驗法比較 推測此2種試驗法比較，經實驗數據比對比重計法較土壤結構沉澱試驗其比例砂粒部分少了20.97%、坋粒多了20.15%、黏粒多了0.83%，原因為比重計法分散土壤團粒較為徹底，因土壤團粒為砂粒、坋粒及黏粒所集結而成，檢測時必須將促使團粒的膠結類物質去除打散 ，以精確檢測土壤質地。 比重計法優點 (1)添加過氧化氫消除有機質 (2)添加了鹽酸去除是土壤團粒黏著劑的可溶性鹽類 (3)並直接添加六偏磷酸鈉將土壤溶液裡的Ca2+複合物及土壤顆粒的中Ca2+由Na +取代，鈉離子會使土壤團聚體分解至土壤顆粒分散(Kettler et al.,2001)。 (4)使用電動攪拌器使土粒更均勻分散以及使用比重計更能精準量測。 而土壤結構沉澱試驗此法