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* 试剂纸法： 在平板计数法的基础上，发展了小型商品化产品以供快速计数用。形式有小型厚滤纸片，琼脂片等。在滤纸和琼脂片中吸有合适的培养基，其中加入活性指示剂2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC，无色）。待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培养。短期培养后在滤纸上出现一定密度的玫瑰色微小菌落，与标准纸色板上图谱比较即可估算出样品的含菌量。试剂纸法计数快捷准确，相比而言避免了平板计数法的人为操作误差。 纸片法检测大肠菌群是用灭菌滤纸吸收选择性培养基,细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定生长繁殖,大肠菌群在生长发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC(氯化三苯四氮唑)还原成不可逆的甲替产生红色色素,即大肠菌群在纸片上呈红色菌落,菌落周围产生黄圈是大肠菌群分解乳糖产酸使指示剂变色所致.纸片法以它经济、方便、快捷等优点给现场监测带来了极大便利,不但节省了大量人力、物力,而且还为扩大监测覆盖面提供了技术保障; * * S16核蛋白与核糖体结合，以稳定核糖体的三维结构 抗代谢药物的代表——磺胺类药物 抗代谢药物： 一类在化学结构上与细胞内必要代谢物的结构相似，并可干扰其正常代谢活动的化学物质 SMZ：磺胺二甲恶唑 sulfamethoxazole 对氨基苯甲酸(PABA)结构： 磺胺结构： 叶酸结构： 酶1 酶2 二氢喋啶—???二氢喋酸—?二氢叶酸 PABA（磺胺） Glu 酶3 前体 —???四氢叶酸??? TMP ? 嘌呤 嘧啶 核苷酸 酶1：二氢蝶酸合成酶 酶2：二氢叶酸合成酶 酶3：二氢叶酸还原酶 三甲氧苄二氨嘧啶 抗生素 抑制细胞壁的形成：青霉素 青霉素不能口服，它不耐酸，在胃中被降解 影响细胞膜的功能：多粘菌素 干扰蛋白质合成： 链霉素 阻碍核酸的合成： 博莱霉素 β-内酰氨类抗生素 药物对核糖体的不同作用部位 微生物对环境的适应性 产生钝化酶 细胞内被药物作用的部位发生改变 改变细胞膜的透性 微生物的抗药性 青霉噻唑酸 细菌的耐药机制 1.产生钝化酶 青霉素类：青霉素酶，头孢菌素酶 青霉素抑制细胞壁的合成，主要是抑制转肽酶，因为青霉素的β-内酰胺环结构和D－丙氨酸的结构相似，可与转肽酶的活性中心结合，生成青霉素噻唑酰基酶（oenicilloyl enzyme），从而使转肽酶失去转肽活性 β-内酰胺酶使β-内酰胺环结构开环（水解β-内酰胺环的酰胺键），而使青霉素失去与转肽酶结合的能力，细菌表现出抗药性 寻找解决此类抗药性的思路 对底物（青霉素）进行修饰 破坏钝化酶 替卡西林（羧基噻吩青霉素） 哌拉西林（氧哌嗪青霉素） 替卡 阿莫西林（羟氨苄青霉素） β-内酰胺酶抑制剂的发展 橄榄酸（橄榄色链霉菌）： β-内酰胺族化合物 穿透细胞壁和细胞膜的能力差 在体内代谢快 克拉维酸（棒酸）（棒状链霉菌）：杂氧青霉烯 β-内酰胺酶抑制剂的作用原理 克拉维酸对β-内酰胺酶的活性位点有高的亲和力，可与催化中心结合，以竞争性抑制方式发挥作用 与酶分子中的丝氨酸的羟基发生反应，通过β-内酰胺羰基和β-内酰胺环打开而使酶酰化 脱酰化 氨基糖苷类钝化酶 对氨基糖苷类抗生素分子中的某些保持抗菌活性所必须的基团进行修饰，使其与作用靶位核糖体的亲和力下降 氨基糖苷酰基转移酶（aminoglycoside acetyltransferasea AAC） 氨基糖苷腺苷转移酶（aminoglycoside adenylytransferasea AAD） 氨基糖苷核苷转移酶（aminoglycoside-necleotide transferasea ANT） 氨基糖苷磷酸转移酶（aminoglycoside phosphotransferasea APH） 酰基转移酶AAC 腺苷转移酶AAD 核苷转移酶ANT 磷酸转移酶APH 对氨基糖苷类钝化酶抑制剂的研究还未取得突破性进展 去除易被钝化酶修饰的基团 卡那霉素——地贝卡星(双去氧卡那霉素) 对抗生素的分子进行结构改造，以保护 活性基团 卡那霉素——丁胺卡那霉素（R3＝氨基羟丁酰） 大环内酯类抗生素钝化酶 红霉素酯酶：酯解十四元大环内酯类抗生素的大环内酯部分 林可霉素类钝化酶 使抗生素分子的3、