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低温生物医学技术 第三讲;3.1关于“两步法”低温保存机理的探讨;;;细胞低温损伤的两因素假说;;WHAT;WHY;HOW;;;3.2 玻璃化保存方法的发展;Fahy(1981)首先明确提出：采用高浓度的低温保护剂，可在较慢的冷却速率下实现生物体完全的玻璃化，并于1985在Nature上首次报道鼠胚胎的玻璃化保存获得成功。这是玻璃化保存技术走向实用化的真正突破。;3.3 玻璃化转变的概念;;3.3.1 液体可以通过两种方式而固化;3.3.2 玻璃化转变既与热力学有关，又与动力学有关;;3.3.3 水和水溶液的非平衡性质;1、浓度较低时，只有结晶；
2、浓度较高时，出现部分玻璃化；（高才的研究）
3、浓度很高时，出现完全玻璃化。;;3.4 玻璃化低温保存的若干问题;3.4.1 部分玻璃化;最佳冷却速率与玻璃化;3.4.2 完全玻璃化;3.5 玻璃化溶液;;3.5.1 高压可以降低保护剂的使用浓度;高压下，冰晶很难形成，降低了Th和Tm；但分子之间更加接近，使溶液黏度增加，从而提高Tg。使得保护剂初始浓度可以比较低。;3.5.2 混合使用也可使保护剂的毒性得到抵消或中和;3.6 反玻璃化问题;;;;The end;2.7 冻结过程中的未冻水份额;获得未冻水的方法;;
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