棉花纤维伸长相关基因gbtcp的功能验证-作物遗传育种专业论文.docxVIP

华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 否 如需保密，解密时间 年 月 日 是否保密 lIllllIHIIrllIllllIIrllHIJI J4111 Fill 41JJ IIl 独创性声明 Y3053278 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已 经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位 或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究 所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生张葛晟物帆乃f 6年占月弓目 J 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照 学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电 子版，并提供目录检索和阀览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、 汇编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学 位论文的全部或部分内容，为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递和交 换服务，同时本人保留在其他媒体发表论文的权力。 注：保密学位论文(即涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的 论文)在解密后适用于本授权书。 学位论文作者始葛泉传导师鲐了秀毳涝1 签名目期：乃l c)年6月目 签名日期： 翻((，年 6月午曰 注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之问 万方数据 棉花纤维伸长相关基因GbTCP的功能验证目录 棉花纤维伸长相关基因GbTCP的功能验证 目录 摘要 ．．i Abstract ． ． ． ． ． ． ．． ． ．． ． ． ． ． ． ．． ．． ． ． ． ． ．．ii 缩略词表 iv 1．1棉花概述 1 1．2棉花纤维发育过程 1 1。3棉花纤维品质研究现状 3 1．4纤维伸长相关基因研究进展 4 1．4．1植物激素对纤维伸长的调控 ．4 1．4．2植物转录因子对纤维伸长的调控 ．5 1．4．3部分其它基因对纤维伸长的调控 ．6 1．5 TCP类转录因子家族研究进展 6 1．6启动子对基因的作用 8 1．7本课题的研究目的及意义 9 1。7技术路线 ．．10 2．材料与方法 1l 2．1实验材料 ．．1 1 2．2实验方法 ．11 2．2．1基因序列分析 11 2．2．2载体构建与遗传转化 11 2．2．3 Southern杂交 13 2．2．4棉花总RNA的提取及反转录 1 5 2．2，5表达量检测 16 2．2．6 JA含量测定 ．．18 2．2．7纤维品质检测 19 2．2．8扫描电镜观察胚珠表面及成熟纤维横截面 19 3实验结果与分析 21 3．1 G6亿『P基因序列与表达分析 ．21 万方数据 华中农业大学2016届硕士研究生学位(毕业)论文3．2转基因植株插入拷贝数和表达量的检测 华中农业大学2016届硕士研究生学位(毕业)论文 3．2转基因植株插入拷贝数和表达量的检测 ．．23 3．3在棉花中PFBP7驱动GbTCP超表达导致成熟纤维变长变细，PGbEXPA2驱动 GbTCP超表达导致纤维变短变粗 26 3．4 GbTCP转基因植株不同时期纤维中JA含量的变化 ．．30 3．5 GbTCP转基因植株中纤维发育相关基因的表达分析 ．31 4讨{仑 ．34 4．1 PFBP7驱动GbTCP超表达能够促进纤维伸长而PGbEXPA2驱动GbTCP超表 达却抑制纤维伸长的可能原因 34 4．2本研究不足之处及后续实验 ．．35 参考文献 37 附录 ．．42 附录1．主要缓冲液配方 ．．42 附录2主要培养基配方 43 附录3．DNA提取方法 ．44 附录4试剂盒法提取RNA ．45 附录5海岛棉中G6亿P表达模式图 ．46 硕士期间己发表论文 47 致{射 ．．48 II 万方数据 棉花纤维伸长相关基因G6陀P的功能验证摘要 棉花纤维伸长相关基因G6陀P的功能验证 摘要 棉花是世界上最主要的经济作物之一，在我国国民经济中占有十分重要的地位。 棉纤维由胚珠表皮细胞发育而成，是一种重要的天然植物纤维，主要用于纺织工业。 棉纤维的品质与产量一样，都直接影响着我国的纺织工业发展和国民经济收入。因 此，改良纤维品质已成为棉花育种的主要目标。 在本实验室的早期研究中，从海岛棉纤维均一化cDNA文库中获得了一个class I TCP家族的成员基因GbTCP，该基因在纤维伸长时期优势表达。利用RNA干扰 (I斟Ai)技术在棉花中抑制该基因表达可导致纤维变短，表