麋鹿角补阳功效评价研究-中药学专业论文.docxVIP

研究生优秀毕业论文 江苏大学硕士学位论文摘要 江苏大学硕士学位论文 摘要 麇鹿角为麇鹿Elaphurus davidianus Milne．Edwards的雄鹿已骨化脱落的角，入药历史 悠久，是一种名贵稀缺的补益类中药材，具有补阴、补阳、强筋骨、益精血的功效，用于 虚劳赢弱，精血不足，阳痿，不孕，腰膝酸软，筋骨疼痛等症。本论文以麇鹿角为研究对 象，开展了一系列对麇鹿角补阳功效的评价性研究。采用了氢化可的松致大鼠肾阳虚和“房 事不节，劳倦过度”致雄性小鼠肾阳虚这两个经典模型，同时结合以分子细胞学角度，分 别侧重于不同方向不同角度对麇鹿角补阳作用功效进行了评价及机理探究，以期为麇鹿角 资源的开发和综合利用提供科学依据。主要研究内容和结论简述如下： 1．麇鹿角对氢化可的松致大鼠肾阳虚模型功效评价研究 本研究首先从一般状况、内分泌系统、免疫系统及血液中的环核苷酸四方面研究了麇 鹿角不同部位对氢化可的松肾阳虚证大鼠的影响，初步探讨其作用机制。在前期研究的基 础上，确定了每个给药部位的最有效作用剂量。再通过复制氢化可的松致大鼠肾阳虚模型， 采用UPLC．QTOF．MS的代谢组学技术分析模型组和麇鹿角粉组、水提取物组、药渣组给 药后大鼠血清代谢图谱，寻找其作用于肾阳虚证大鼠血清代谢特征(包括生物标志物和代 谢途径)和整体代谢轨道，结合这两部分的研究结果，系统地阐明麇鹿角不同部位对肾阳 虚证大鼠的作用机制，为麇鹿角的补阳作用的活性部位和功效物质基础提供科学依据。 (1)生物效应体系评价研究 本实验采用氢化可的松大鼠肾阳虚模型，将肾阳虚大鼠随机分为8组：模型对照组， 阳性对照(金匮肾气丸)组，麋鹿角原粉低、高剂量组，麋鹿角水提物低、高剂量组，麇 鹿角药渣低、高剂量组，另取8只健康大鼠作为空白对照组。实验结果表明，与模型组比 较，各给药组和阳性对照组大鼠血清ATCH、CORT、T3、T4、T、cAMP／cGMP比值、19G 和lgM水平均明显升高，胸腺、脾脏、肾脏指数显著增加，E2和TSH水平明显下降，体 重下降趋势得到纠正，表明各组均可不同程度促进肾阳虚大鼠体征的改善。 可见，肾阳虚证存在内分泌、免疫功能紊乱，麇鹿角不同部位能不同程度地调节内分 泌、免疫功能，改善肾阳虚证大鼠症状，其补阳功效与其调节神经内分泌网络功能密切相 关。 (2)血清代谢组学研究 复制氢化可的松致肾阳虚证大鼠模型，基于UPLC-QTOF-MS技术对正常组、肾阳虚 1 万方数据 麇鹿角补阳功效评价研究 麇鹿角补阳功效评价研究 证模型组和麇鹿角各给药治疗组大鼠血清中小分子代谢物进行分析，采用主成分分析和正 交偏最小乘判别分析法进行数据处理，寻找生物标志物和代谢通路，同时检测血清中生化 指标水平。结果表明：与正常组比较，模型组大鼠血清中ATCH、CORT、T3、T4含量显 著降低，TSH含量明显升高。这表明HPA，HPT轴出现了紊乱。麇鹿角粉组、水提组和药 渣组均可显著提高血清中ATCH、CORT、T3、T4含量，降低TSH含量。确定了19个生 物标记物，如前列腺素E1、L．甲状腺素、甘油二酯、甘油三酯、酰基辅酶类、溶血磷脂类 等内源性生物标记物。涉及线粒体脂肪酸伸长代谢，甘油磷脂代谢，脂肪酸代谢，花生四 烯酸代谢等代谢途径。发现麇鹿角各给药组对这些标记物具有显著地回调作用。 本研究揭示了麇鹿角各给药组能通过影响相关代谢产物变化，来调节肾阳虚证大鼠体 内紊乱的代谢通路并使其像正常状态转归，证明麇鹿角各给药部位均能干预肾阳虚证大鼠 症状。 2．麋鹿角对雄性小鼠房劳肾阳虚模型功效评价研究 麇鹿角传统功效中滋阴壮阳、补肝。肾、填精髓，主治虚劳赢弱，精血不足，阳痿，提 示麋鹿角对机体性腺功能具有调节作用。 基于前期研究的基础上，麇鹿角不同部位能不同程度地缓解氢化可的松致小鼠1肾阳 虚下丘脑．垂体．性腺轴的紊乱。为了进一步探讨麇鹿角不同部位对肾阳虚证模式生物的干 预作用，本研究复制了“劳倦过度，房事不节”肾阳虚小鼠模型，通过分析麇鹿角不同部 位对肾阳虚证小鼠的体重、生殖功能的影响。并基于前期研究的基础上，采用 UPLC．QTOF．MS的代谢组学技术分析正常组和模型组、水提组、醇提组、药渣组和麇鹿 角粉组给药后小鼠血清代谢图谱，寻找其干预肾阳虚证小鼠的生物标志物和代谢途径，结 合这两部分的研究结果，探讨了麇鹿角各给药部位对该模式生物的影响及作用机制，进一 步为麇鹿角的补阳作用功效提供科学依据。 (1)生物效应体系评价研究 各给药组与模型组相比：小鼠体重持续升高，麇鹿角醇提高、低剂量组及水提高、低 剂量组有较明显的升高体重的趋势。麇鹿角各治疗组均能提高小鼠。肾脏、睾丸及附睾、包 皮腺和精囊腺脏器指数；捕捉潜伏期及交配潜伏期显著缩短，捕捉次数及交配次数显著增 加，其中醇提高、低剂量组捕捉次