棉铃虫变态时期差异表达基因的鉴定及真核起始因子5c基因克隆及性质研究-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

山东大学博士学位论文符号说明 山东大学博士学位论文 符号说明 糊 英文全称 中文全称 娜 Ampicillin 氨苄青霉素 印 Base pair 碱基对 一 Complementary DNA 互补DNA 一 Deoxyribonucleoside triphosphate 脱氧核糖核苷三磷酸 跚 Glutathion S-Transferase ，谷胱苷肽S．转移酶 一 Helicoverpa armigera eukaryotic棉铃虫真核起始因子5C translati叩initiation factor 5C l詈 Isoprophylthio-p-D-galactoside 异丙基硫代-p-D一半乳糖苷 眈 Kilodalton 千道尔顿 h Hour 小时 ．虿 Minute 分钟 啪 Second 秒 l量 Phosphate-Buffered Saline 磷酸缓冲盐溶液 腿 Polymerase Chain Reaction 聚合酶链式反应 皿 Isoelectric Point 等电点 呻 Revolutions per minute 转每分钟 一 SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis SDS．聚丙烯酰胺凝胶电泳 跚 Suppression subtractive hybridization 抑制性消减杂交 眦 Tris／acetate／EDTA／buffer Tds乙酸EDTA电泳缓冲液 聊 7hermus aquaticus DNA 栖热水生菌DNA聚合酶 哪 Tris．buffered saline Tris缓冲盐溶液 一 Tris-hydrochlorido Tris盐酸盐 Ⅻ 5-bromo-4-ehloro-3一hadolyl—D．D·朗Iac缸搭idc 5-溴4氲-3·吲哚·附畔乳糖苷 9 原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立 进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含 任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出 重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责 任由本人承担。 论文作者签名： 专!兰坠 日 期：型姗 关于学位论文使用授权的声明 本人同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的印刷件和电 子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全 部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制 手段保存论文和汇编本学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：耋坚堕导师签名：‘坠!：竺 日 期：塑 山东大学博士学位论文曼皇曼皇曼皇曼量量量量皇曼曼曼曼曼量量量曼皇量曼皇曼寡曼曼曼量璺鼍曼曼曼皇量曼曼曼曼皇曼量曼量曼曼量皇曼舅量皇曼皇曼曼曼量曼詈曼量鼍n 山东大学博士学位论文 曼皇曼皇曼皇曼量量量量皇曼曼曼曼曼量量量曼皇量曼皇曼寡曼曼曼量璺鼍曼曼曼皇量曼曼曼曼皇曼量曼量曼曼量皇曼舅量皇曼皇曼曼曼量曼詈曼量鼍n m—n皇量皇曼皇曼皇量 棉铃虫变态时期差异表达基因的鉴定及真核起始因子5C 基因克隆及性质研究 摘 要 棉铃虫(Helicoverpa armigera)属于鳞翅目夜蛾科(Lepidoptera Noctuidae)，在 世界各地广泛分布，危害棉花、谷物、玉米、土豆、大豆、高粱和烟叶等农作物 达上百种，往往造成巨大的经济损失，是我国和世界农业的主要害虫之一。目前 棉铃虫防治中使用的大多数化学农药对环境和人类健康有害，而对于转基因作物 如Bt抗虫棉的安全性也存在争议。因此在理论研究的基础上，发展新型生物农 药一直是害虫防治的研究热点。完全变态类昆虫要经过周期性幼虫蜕皮和变态才 能完成整个生活史，昆虫发育的生理活动是在一系列激素的精细调控下才得以顺 利完成。通过对棉铃虫蜕皮相关基因的研究，不仅可以为进一步了解昆虫的生长 发育和蜕皮激素调控的分子机理奠定基础，而且在此基础上可以发现新的分子靶 标，为害虫防治提供新思路。本论文利用抑制性消减杂交(Suppression subtractive hybridization，SSH)的方法鉴定在棉铃虫变态时期差异表达的新基因，并从中选择 棉铃虫真核起始因子5C(eukaryotic translation initiation factor 5C，eWSC)作为研究 对象，克隆了该基因的全长，并对它的性质进行了研究。 蜕皮对于全变态昆虫来说，是一个重要的生理过程。全变态昆虫的一生经由 一系列蜕皮活动完成，其中包括幼虫蜕皮，即各个龄期之间的蜕皮、化蛹蜕皮和 羽化蜕皮，后两者称为变态蜕皮