赛默飞世尔科技超微量紫外可见光分光光度计NanoDrop应用如何避免.PDFVIP

赛默飞世尔科技超微量紫外可见光分光光度计NanoDrop 应用 如何避免植物样本核酸提取时多糖的残留 前言 加入氯仿 的混合液 用最大速度混匀 秒 （ ） ， 。 4. :IAA 24:1,500ul 30 用分光光度计检测核酸的方法已经非常普遍了 包括对 和 ， DNA RNA 用 离心样本 分钟 将上清转移到一个新的 5. 13,000 X g 5 ， 1.5ml 进行定量 甚至评估它们的纯度 检测的方法是 检测 的吸 ， 。 ， 260nm 离心管中 重复 步 ， 4-5 。 收值 再换算成核酸的浓度 其他波长的吸收值 特别是 和 ， 。 ， 280nm 用等体积的预冷异丙醇来沉淀核酸 并在 ℃过夜。 可以通过与它们的比值来判断样本的纯度 因为蛋白的最 6. ， -20 230nm， 。 高吸收峰为280nm，所以A260/A280 可以评估蛋白在核酸样本中污 用 离心样本 分钟 用 乙醇洗涤核酸沉淀 7. 13,000 X g 15 ， 1ml 70% ; 染的情况 如果 小于 通常认为这个样本的纯度很差 ： A260/A280 1.6 ， 核酸沉淀干燥 并重悬于 中。 8. , 50ul dH2O 只有当 大于 则认为这个样本的纯度还不错 同样的 A260/A280 1.8 。 ， 因为有很多多糖的吸收峰在230nm，所以A260/A230 常用于判断多 9. 用NanoDrop 2000 检测核酸的浓度和纯度。 糖污染的情况： 小于或等于 通常认为这个样本的纯 A260/A230 1.6 * 低盐缓冲液 = 0.5 M NaCl; 高盐缓冲液= 1.5 M NaCl。 度很差 只有当 大于 则认为这个样本中多糖的污染 , A260/A230 1.9 很少。 结果 我们做了四组实验 分别为 马铃薯样本用高 低盐缓冲液 黄瓜