课件：三免疫酶组织化学技术.ppt

大多数试验室用枸橼酸盐缓冲液（pH6.0), 优点背景清晰 高pH值的修复液适用于大多数的抗体 如使用pH9.0的修复液，可适当提高一抗 的效价 pH值是抗原热修复的关键因素 抗 原 修 复 D2-40：不同pH值修复液对比　 1:150　pH6.0 1:300 pH9.0 说 明 CD15 1:50,HIER Ci pH6 CD15 1:100,HIER Tris/EDTA pH9 ER:同一浓度不同修复液比较 pH6.0 pH9.0 固定时间对修复的影响 固定时间越长，需要的修复强度越强 同等修复条件下，必须延长修复时间 或提高修复的强度 固定时间对抗原修复的影响 多克隆抗体S-100 神经纤维及恶黑肿瘤细胞 均为阳性表达 单克隆抗体S-100 神经纤维阳性 恶黑肿瘤细胞无阳性表达 中性福尔马林固定48小时 中性福尔马林固定72小时 目的 — 减低非特异性杂交 时间 — Bio / Dig 探针可缩 短为15min 杂交后的冲洗