胃癌组织中Caveolin-1和E-cadherin的表达特点和两者间相关性的判定.pdfVIP

和两者间相关性的判定 硕士研究生：刘铭 指导教师： 李宏教授 专业名称： 病理学与病理生理学 摘 要 背景和目的：胃癌是最为普遍的恶性肿瘤之一，也是癌症致死的 重要原因。胃癌的发生和发展是一个多基因、多因素、多阶段的动态 演变过程，涉及到癌基因的激活、抑癌基因的失活以及由此引起的细 胞生物学行为的改变等。这些遗传学变异相互协同，相互作用，共同 促进肿瘤的形成。因此，研究胃癌的发病机制并寻求早期诊断及防治 措施一直是人们广泛关注的焦点。 蛋白，而caveolae是各种信号分子和信号通路的整合器。肿瘤的发生发 展与细胞增殖、分化、迁移、凋亡及血管生成的信号通路异常有关。 中的重新表达能诱导癌细胞的分化，抑制癌细胞的转移，具有抑癌基 因样作用；但近几年研究亦发现：caveolin．1在前列腺癌和膀胱移行细 胞癌中表达明显升高，且有促进癌细胞增殖及淋巴结转移的作用。以 上提示，caveolin-1的生物学作用具有双重性。 细胞黏附分子E．cadherin的异常改变与胃癌的发生发展密切相关。 E．cadherin的表达减少或丢失被认为是细胞去分化的一种危险因素，是 癌症患者预后不佳的生物标记物之一。近来的研究表明，Writ信号途 E．cadherin形成复合物定位于细胞膜的胞浆面而介导细胞间的黏附； cell enhancer 细胞核内；后者与TCF／LEF(T factor，T- factor／lymphoid 细胞因子／淋巴细胞增强因子)结合，从而促进一系列靶基因的转录。 与13．catenin间的相互作用，使后者磷酸化减少，避免降解，从而加强了 细胞间的粘附强度。反之，当caveolin．1表达降低或缺失时，GSK．313 使p—catenin磷酸化并引起后者降解，细胞间粘附被破坏的最终结果是导 致细胞松散和离散。 瘤生物学意义的研究多为单项研究，缺乏对这两者相互关系分析的报 道。据此，本课题在组织病理学观察的基础上，利用多种实验方法， 的位置关系进行同步观察，并就它们之间的交互影响／作用以及与不同 类型胃癌的关系进行细致的研究。 材料与方法：胃癌石蜡和冰冻组织标本选自大连医科大学细胞生 物学教研室(辽宁省高校癌症基因组学重点实验室)建立的人癌组织 库。胃癌细胞系AGS、HGC一27购于中国科学院上海分院细胞库； MGC803、BGC823均从北京肿瘤研究所引进。采集的胃癌组织按 Lauren分型分为肠型和弥漫型两个亚型，并以癌旁相对正常粘膜和癌 前病变(萎缩性胃炎和肠上皮化生)作为对照。基于石蜡组织微阵列， 结合组织特定区域的蛋白定点捕获，应用免疫组织化学和Western蛋白 中的表达特点与分布情况。进一步应用RT-PCR、Western蛋白印记分 达特点。用Kruskal．Wallis检验方法对上述指标在不同类型胃癌组织的 表达情况进行差异分析；用Spearman相关分析检测这两个指标间的相 关性。 结果： 1．在仅有的3例相对正常胃粘膜中，细胞膜上的E—cadherin均为 强阳性，而细胞膜上的Caveolin．1均为阴性(由于样本例数太少，未 列入统计学运算)。胃癌组织与癌前病变相比，细胞膜上的E．cadherin 平明显低于在肠型胃癌中的表达(P0．01)。胃癌组织与癌前病变相比， 在弥漫型胃癌中的表达水平明显低于肠型胃癌。在22例淋巴结转移灶 细胞膜表达。 3．胃癌组织的Western蛋白印迹结果显示：与癌前病变相比，弥漫 型胃癌中的表达更低甚至无表达。与癌前病变相比，caveolin．1在肠型 胃癌和弥漫型胃癌中的表达无明显变化，即无增减趋势。由于肿瘤的 响了对caveolin-1真实表达情况的判定。 4．双标记免疫荧光染色的结果示：形态学上未看到caveolin．1和 E．eadherin在胃癌细胞膜上或胞浆中有明确的相同的位置关系，即未看 mRNA含量及其相应的蛋白表达高低并不一致，即无规律性。 癌组织中的表达降低，而细胞膜caveolin．1在胃癌中表