制作冰冻切片的方法及体会.pdfVIP

实用医技杂志2011年5月第 18卷第5期 JoumalofPracticalMedicalTechniⅡues，Mac2011，Vo1．18，No．5 ·507· [2】 BryanLE．Transferableehloramphenieolandampoeillinresis- [3】 束学安，罗之侗．耐氨苄西林流感嗜血杆菌产内酰胺酶机制研 tanceinastrainofHaemophiluainfluenzae．Antimicrob Agents 究．第二军医大学学报 ，1999，2O(10)：610． Chemother，1978，14(1)：154． (收稿 日期：2011-01—04) 制作冰冻切片的方法及体会 中国医科大学绍兴医院(312030) 陶丹华 冰冻切片病理诊断是手术过程中确定疾病性质，指导临 3．2．2 切片：切片前必须调节好刀座的角度，防止污染及出现 床医生决定手术方案的一种快速而又可靠的手段。高质量的 皱褶。冰冻切片是利用低温切片上的组织与常温下的载玻片 冰冻切片是迅速作出术中病理诊断的基础和前提 ，冰冻切片 的温度差立即贴片，所以粘贴速度要快，如果贴片速度慢 ，或 质量的好坏直接关系到病理诊断的及时性和准确性ll】。如何 待拿出切片机后再贴片，组织切片温度增高，水分溢出，切片 快速有效地制作好冰冻切片是组织和病理学技术人员面临 组织变软，贴不成片刚。如果碰到容易掉片的组织，如软骨、脂 的重要问题。笔者近期完成冰冻切片共250份，其中包含有 肪 ，可采用含有黏附性强的载玻片进行贴片，以防止在染色过 乳腺 、甲状腺、胃、肠、卵巢等，其制作体会报告如下。 程中发生脱片。我科使用的是涂有APES的免疫组织化学片， 1 材料与方法 其黏附性好，可收到理想效果。在切片过程中，因过分冷却会 1．1材料 ：德国Leica--CM1900恒温冷冻切片机、DurAedge 使组织过脆，可利用体温用手轻按标本切面，即可使组织温度 一 次性切片刀、普通胶水、95％乙醇溶液、苏木素染液、Scott 快速回升。 促蓝液、1％醇溶性伊红、各梯度乙醇溶液、二甲苯。 不同组织的形态结构和组成成分不同，其切片的温度和 1．2 方法：一般取材厚度为0．2—0．3cm，大小为 1．0～1．5cm。 厚度也有所不同，应根据具体组织情况适当调整温度。 取一组织包埋 ，将组织平放于上面 ，滴加少许胶水 以作包埋。 冰冻切片并不是越薄越好，普通组织厚度约6LLm即可， 组织块冷冻好后，进行组织的修整和切片，并贴附于载玻片 过薄则易造成组织皱缩和镜下细胞核的碎裂四。一般组织结构 上，立即置于95％乙醇溶液中。切片从固定液中取出，水洗后 单一的可薄切，含脂肪多的、结构复杂及硬度较大的可适当厚 进行常规苏木素一伊红(HE)染色。 切。 2 结 果 3．2-3 固定：切好的组织在干净的载玻片上贴附后应立刻放 切片组织结构完整，厚薄均匀、无皱褶、刀痕、重叠。光镜 入固定液中固定，勿使切片在空气中干燥，否则会造成细胞核 下组织结构及细胞染色清晰、核质分明、透明度好。 在空气中发生退变，细胞着色力下降，导致染色后细胞核模糊 3 讨 论 不清，影响镜检和诊断。 3．1 取材 3．2．4 染色、封 固：固定后水洗直接人苏木素 12min(我科 外科手术标本必须在短时间内送达病理科，以保证组织 使用为改良Gill苏木素)常规HE染色。平时应注意及时更换 的新鲜。病理科医生在取材时，应保持取材台面和器械的干 染色试剂，否则易导致脱水不净致使切片不透明，出现云雾现 燥和洁净 ，避免手术标本与水的接触。取材时要