医疗仪器原理第四章临床检验分析仪器3色谱仪精讲.ppt

4.5 色谱仪一、色谱法 色谱法：层析法，让含有多个组分的溶液流过一个色谱系统使溶液中的各个组分互相分离的一种方法。 色谱系统：由固定相和流动相组成。固定相指阻碍溶液中组分流动的物质，而流动相指带着组分向前流动的物质 色谱法最早用于分离植物色素： 在玻璃管中放入碳酸钙-----将含有植物色素的石油醚倒入管中（玻璃管的上端出现几种颜色的混合谱带）-----用纯石油醚冲洗，逐渐分开成几个不同颜色的谱带带，最后分别接得各种颜色的色素-------分别进行鉴定。 色谱分离基本原理 分离原理：利用待分离的各种物质在固定相和流动相中的分 配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离。 实现：使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用，由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。 色谱法 液相色谱法 气相色谱法 气-液色谱法 气-固色谱法 液-固色谱法 液-液色谱法 ● 色谱法的分类 根据固定相的分布形式进行分类 根据流动相和固定相的状态进行分类 1）柱色谱：以填入金属管或玻璃管中的吸附剂等物质作为固定相 2）纸色谱：利用滤纸作载体，用吸附在纸上的水作固定相； 3）薄层色谱：以涂在玻璃板或塑料板上的吸附剂薄层作为固定相 ●吸附色谱法：利用吸附剂（固定相一般是固体）表面对不 同组分吸附能力的差别进行分离的方法 ●分配色谱法：利用不同组分在两相间的分配系数的差别进行 分离的方法。 根据分离原理分类 ●色谱流出曲线（色谱图）及有关术语 （一） 色谱仪的分离和检测过程 （二）色谱流出曲线 二、气相色谱仪 ●色谱仪：由色谱柱、流动相供给和控制系统，检测装置、信号 放大和处理系统、输出设备等组成的具有分离功能和 定量功能的高精度、高效率仪器。 ●气相色谱仪的特点： 1）能分离气体、液体及挥发性固定 2）分离效能高：上百种样品 3）分析灵敏度高：0.1ppb 4）分析速度快 5）样品用量：1ul（液体）；1-5ml（气体） H2,N2或Ar 气路系统 进样 系统 检测系统 分离系统 温控系统 气相色谱仪 组成：气路系统、进样系统、分离系统（色谱柱）、检测系统、 及温控系统 气路系统 作用：获得纯净、流速稳定的载气 分类：单柱单气路、双柱双气路 组成：压力计、流量计及气体化装置 ●载气：化学惰性。载气的选择考虑对柱效的影响，并与分析 对象和检测器相配。由高压气瓶提供。 ●净化器：多为分子筛和活性碳管的串联，可除去水、氧气以 及其它杂质 ●压力表：多为两级压力指示。 第一级：钢瓶压力(总是高于常压。对填充柱：10- 50 psi；对开口毛细管柱：1-25 psi) 第二级：柱头压力指示； ●流量计： 在柱头前：使用转子流量计，但不太准确 在柱后：以皂膜流量计测流速 电子流量计：并以计算机控制其流速保持不变。 2. 进样系统 作用：通过进样装置将样品注气化室 组成：进样装置（六通阀、微量注射器）、 气化室 六通阀的工作原理图 说明：●六通阀的组成：阀体和阀瓣 ●六通阀适于气体样品进样，而注射器适用于液体样品 ●左图为取样时的气路；右图为进样时的气路 载气 隔膜 气化室 注射器 针头 色谱柱 载气 隔膜 汽化器工作原理图 3. 柱分离系统（色谱柱） 分类：填充柱、开管柱(毛细管柱) 柱材料