课件：第三章--糖和苷类化合物.pptVIP

5、从杨柳树皮中分得一酚苷，酸水解后得1分子的D-葡萄糖和1分子的邻羟基苯甲醇。此酚苷的氢谱中有δ4.37（1H，d，J=7.5Hz)的信号,写出其结构式并加以解释. THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 一、提取 主要为溶剂法——水、稀醇、醇 1.糖类：根据它们对乙醇和水的溶解度不同，而采用冷热水、冷热稀醇等条件。 单糖、低聚糖：水、稀醇 多糖：热水提取，（不包括纤维素和半纤维素） 第三节 糖和苷类的提取分离 2.苷类：由于其分子的极性随着糖基的增多而增大。可根据其极性大小，来选择相适应的溶剂。 连糖基多苷类：醇或稀醇提取。 连糖基少苷类：CHCl3或EtOAc提取。 原生苷：要破坏酶的活性，用沸水、乙醇或甲醇来提取或加碳酸钙，中性条件下提取。 次生苷：先发酵或选择性部分水解后再提取 3.苷元：先水解后用低极性溶剂提取；或先提出总苷再水解得苷元。 一、提取 流程图 二、分离 糖的分离 1、色谱法（活性炭色谱、大孔树脂色谱、凝胶滤过色谱） 2、分级沉淀或分级溶解法 3、制备性区域电泳 苷的分离 1、溶剂法 2、大孔树脂法 2、色谱法：硅胶、反相硅胶色谱、离子交换树脂色谱、葡聚凝胶色谱等 第四节 糖和苷类的检识 一、理化检识 1、Molish反应 2、Fehling反应 3、 Tollen 反应 4、水解反应 二、色谱检识： TLC，PC 显色剂:苯胺-邻苯二甲酸 紫、棕、红色 阳性反应条件：还原糖 糠醛形成反应 糠醛及衍生物与α-萘酚缩合物 Molish 反应： 试剂：浓H2SO4，α－萘酚 Molish反应用途：用来鉴别糖和苷，区别苷和苷元。 （二）糠醛形成反应 糠醛衍生物＋芳胺或酚类 缩合 显色 （苯酚、萘酚、苯胺、蒽酮等） 样品＋浓H2SO4＋ α－萘酚 棕色环 （单糖、低聚糖、多糖、苷） 1、Molish反应 糖(或苷)+ α-萘酚—浓硫酸 两液面处出现紫红色环 应注意碳苷和糖醛酸常呈阴性反应 2、Tollen 反应(银镜反应） 还原糖+氨性硝酸银[即Ag(NH3)2+] Ag↓ (银镜或黑色沉淀) 3、Fehling反应 还原糖+碱性酒石酸铜 CuO2↓(砖红色沉淀) 反应 试剂 结果 + - Molish反应 浓H2SO4, α-萘酚 紫红色环 糖，苷 苷元、碳苷、糖醛酸 Tollen反应 氨性硝酸银试剂 银镜或黑褐色的银沉淀 还原性的糖 非还原性的糖 Fehlling反应 碱性酒石酸铜 砖红色沉淀 还原性的糖 非还原性的糖 PC(TLC) 苯胺-邻苯二甲酸 紫、棕、红色 还原性的糖 非还原性的糖 第六节 苷类的结构研究 一、物理常数测定 二、分子式测定：质谱法 三、苷元和糖的鉴定： 1、糖的种类 TLC，PC，HPLC 用1HNMR，13CNMR ，2D-NMR数据鉴定 2、糖的数目的测定： 用TLC，PC，HPLC定量法 用1HNMR，13CNMR中端基氢或端基碳的数目来确定；用COSY数据确定 四、糖和糖之间连接顺序的确定 1、部分水解 2、波谱分析法： MS法 NMR法 五、苷元和糖、糖之间连接位置的确定 1、苷元和糖连接位置的确定：13CNMR法（苷化位移） 2、糖之间连接位置的测定： 全甲基化水解法 NMR法 六、苷键构型的决定 ⑴ 分子旋光差（klyne法） ⑵ 酶催化水解方法：酶水解具有高的专属性。可以选择性地催化水解某一构型的苷。 如：麦芽糖酶－水解α-D-葡萄糖苷键 纤维素酶－水解β- D-葡萄糖苷键 ⑶ 核磁共振波谱法： 氢核磁共振波谱（1H－NMR） 碳核磁共振波谱（13C－NMR） 一、糖链结构的测定 主要解决的问题： 1．单糖的组成 2．单糖之间连接位置的决定 3．糖链连接顺序的决定 4．苷键构型的决定 1．单糖的组成 低聚糖、多糖的结构分析，首先要了解由哪些单糖所组成，各种单糖之间的比例如何。 一般是将苷键全水解，用PC检出单糖的种类，经显色后用薄层扫描仪求得各种糖的分子比。 也可用TLC或HPLC对单糖定性定量。 2．单糖之间连接位置的决定 1）部分水解法： 将糖链全甲基化→水解→甲基化单糖的定性和定量（气相层析） 可以获知被测物中含有的糖的类型、甲基化的位置及相互之间的分子比等。 （1）甲基化单糖中游离-OH的部位就是连接位置 （2）全甲基化的单糖即是末端糖。 2）13C-NMR测定：主要归属各碳信号，以确定产生苷化位移的碳。 3．糖链连接顺序的决定 1）缓和水