课件：芳酸类非甾体抗炎药物的分析新仁济.ppt

* 血浆样品处理 血浆 上清液 色谱条件 色谱柱: 手性色谱柱OJ 流动相: 正己烷-异丙醇-三氟乙酸 标准溶液配制 精密称取对照品，溶解稀释成一定浓度，加入空白血浆，同血样前处理方法 对照液 方法验证 置于具塞离心管 除蛋白试剂 涡旋振荡 离心 N2气流吹干 * * 小结 芳酸类非甾体抗炎药物的分析 1．掌握水杨酸类药物的结构特点与化学性质： （1）羧基——酸性 （2）酚羟基特性 （3）酯键——水解性 （4）苯环——紫外特征吸收 * 2．掌握芳酸类药物的鉴别： （1）与FeCl3反应（条件及产物颜色） （2）水解反应（阿司匹林 ） （3）紫外吸收光谱法 3. 熟悉特殊杂质检查 阿司匹林中水杨酸的检查 对乙酰氨基酚中对氨基酚等有关物质的检查 * 4．掌握几种重要的含量测定方法： （1）酸碱滴定法应用于阿司匹林 直接滴定法，水解后剩余滴定，两步滴定法的原理、注意事项、含量计算 （2）紫外分光光度法（制剂计算、柱分配色谱后测定） （3）HPLC法（离子抑制色谱） THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * * * *原料残存（原料乙酰化不完全） 1、来源 乙酰化 70~75℃ （一）阿司匹林中游离水杨酸 *水解产生 * 2、检查方法 限量检查法 （1）原理 酚羟基-三氯化铁反应 水杨酸可与高铁盐反应呈紫堇色 * （2）限量规定 原料 0.1% 阿司匹林片 0.3% 阿司匹林肠溶片 1.5% 阿司匹林栓 3.0% （HPLC法） * *中间体、副产物等——有关物质 如：对硝基酚、对氨基酚、对氯苯乙酰胺 1、来源 （二）对乙酰氨基酚中有关物质检查 *水解产生——对氨基酚 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * 2、检查方法 HPLC主成分自身对照法外标法 √内标法 * 四、含量测定 （Assay） 酸碱滴定法 紫外分光光度法 HPLC * ?（一）、酸碱滴定法 直接滴定法 水解后剩余滴定法 两步滴定法 [滴定分析示意图] 0 0 0 pH NaOH 加入量( ml ) ------------- 化学计量点 NaOH ＋ 药物 钠盐 ＋ H2O * 有关术语：滴定突跃、突跃范围、化学计量点、滴定终点 ----------- NaOH 药物 * 直接滴定法 反应原理：利用其游离羧基的酸性 酸碱中和，反应摩尔比1:1 酚酞 * 阿司匹林 ChP（2010） 缺点： 酯键水解干扰 酸性杂质干扰 * +NaOH 中和乙酸 溶解阿司匹林 防止酯键水解 注意事项 用中性乙醇，溶解阿司匹林且防止酯键水解 “中性”是对所用的指示剂而言 不断搅拌、 快速滴定，以防止水解 适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定 * 2. 水解后剩余滴定法 加入定量过量碱，羧酸中和 羟基酯结构, 遇碱水解 剩余碱用酸回滴 优点： 反应原理： 不存在酯键水解的干扰 、酸性杂质干扰 * 阿司匹林 USP（32） 水解： 剩余滴定： 2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O 反应摩尔比为1∶2 同时进行空白试验： 酚酞 不加供试品相同条件操作 * 剩余滴定法为什么空白试验？ 1ml 氢氧化钠（0. 5mol/l） 1ml 硫酸（0. 25mol/l） 相当 消除CO2的影响及空白试剂 空白消耗的体积与含量计算有关 滴定液吸收CO2转变成Na2CO3 由于酚酞为指示剂 硫酸回滴时化学计量关系不同 * 空 白 滴 定 NaOH H2SO4 V0 V V1 V2 剩余滴定法消耗NaOH V1＝ V0-V NaOH H2SO4 * 3. 两步滴定法 反应原理：反应分两步进行 第一步 中和（酸杂质） 第二步 水解、剩余滴定 适用对象：