一种新地电化学发光试剂与用于DNA氧化损伤表征地研究.pdf

一种新的lU化学发光试剂及用于DNA氧化损伤表征的研究 第一章 rjf言 化学发光的研究多是针对一些稠环芳烃，如红莹烯、芘类化合物、呋哺、吲哚类 以及葸和它的衍生物等的发光机理(“孙。 70年代，电子技术的迅猛发展，随着高灵密度的光电传感器的开发，电化学 发光技术也得到不断发展。电化学发光的研究范围有了很大的扩展，除研究某些 发光体系外，还对电化学发光的仪器和电极系统进行了改进。在电极种类上，除 了应用固定电极外，开始使用旋转环一盘电极(9“)。70年代还使用了半导体电极， 烯的ECL过程。随着电子技术水平的提高，集成电路的广泛使用，给电化学发光 仪器研制带来了蓬勃生机。这期间除在脉冲信号发生器的线路上有所改进外，已 开始使用多种脉冲信号，如线性扫描、正矩形扫描、双阶跃脉冲等。仪器的改善， 提高了信噪比，使仪器能适用于测定更微弱的光信号，拓展了研究领域。这期间 除研究各种芳烃化合物的ECL外，还发现了许多新体系，如在H2S04和HCl04中 特点，即ECL仪器不论在脉冲信号发生系统还是在光电检测及信号记录等方面， 都紧紧地与新技术相结合，如应用计算机进行数据处理和机理研究，激光也被应 用于这方面的研究。在机理研究方面，利用磁场对电化学影响的磁光效应，进行 了三重态湮灭的研究(16-18)。同时还有人使用光谱电化学方法(19’以及电子自旋共振 (ESR)研究电极表面的产物(2”。 80年代以来，有关ECL的报道逐年增加，ECL开始进入某些实用阶段。由于 它的连续可测性，可方便地用作为液相色谱仪的检测器(2“22)0这时期的工作是对 70年代工作的发展和深化，如开展了膜修饰电极‘23‘241，表面活性剂对ECL的影响 等研究(25-27)。近年来，有人提出了应用电化学发光图像泫(ECLImaging)，研究了 非均相电极表面的电化学活性物质的分布情况‘28枷)，还有人应用该方法研究了盘 电极上非均匀性电流密度的分布特性(3“。 目前在我国，ECL法已引起电化学工作者的重视。福州大学的安镜如等己连 续报道了酰肼类化合物如鲁米诺及其衍生物在碱性环境中的ECL现象及其机理研 究‘32。n。中国科学技术大学的林祥钦等将CV与ECL结合，对经不同预处理的不 同类型的电极对鲁米诺ECL的影响进行了研究，探讨了在碱性条件下不同电极上 的鲁米诺ECL的可能发光机理，并利用多元酚，cu2+等对鲁米诺ECL的抑制作用 一种新的Lb化学发光试剂及用于DNA辄化损伤表征的研究 第一章 0l言 分别进行了测定(38-43)。长春应用化学研究所的董绍钧等对ECL的电物理化学的应 用方面提出了自己的观点，并对酶、有机胺、各种离子进行了测定【44啪)。陕西师 范大学的章竹君等提出了电位溶出化学发光分析法、电生试剂化学发光法等，并 进行了Cu“、多巴胺、潘生丁、丙酮酸、硫离子、土霉素等的测定571。本课题 组经过几年对中性介质鲁米诺电化学发光的深入研究，成功地实现了鲁米诺在中 性环境中的电化学发光‘5孙。并在此基础上间接地对超氧化物歧化酶(SODl(5们、谷 酮化合物进行了分析研究，实现了这些对自由基具有明显清除作用的生物活性物 质简单而灵敏的检测，其中对还原型谷胱甘肽、维生素C的检测限已达皮摩尔级 (60,63)。本课题组还对新型工作电极ITO镀膜玻璃进行了一些研究‘6们，并成功地实现 了电化学发光试剂的固定化(6” 1_3电化学发光的类型 按照电化学发光反应机理，可分为四种类型，即多环芳烃类、氧化物的阴极发 光、金属络合物类化合物和酰肼类。以下简要说明各类的反应机理及其在分析化 学上的主要应用。 1．3．1多环芳烃类的电化学发光 这类化合物的电化学发光最早报道于60年代中期‘68-69)，其代表物质为9，10 一二苯基葸(DPA)。当电极旌加正负阶跃脉冲时，电极附近产生正负自由基离子， 并发生自由基湮灭反应，以单重激发态的形式(S一路径)而发光‘701。当体系含有9， TMPD+与DPAl反应产生的能量不足以产生单重激发态，反应产物为三重激发态的 3DPA*(T路径)，两个3DPA*生成一个1DPA*(7”而发光。 多环芳烃的电化学发光反应多要求非水介质如乙腈、二甲酰胺、苯甲氰等，以 季铵盐为电解质，并要求体系除氧和杂质。所以该体系类型的反应在分析化学上 的应用受到限制，所报道的文献多是自由基湮灭反应机理或电化学发光发光效率 测定的研究。 1．3．2氧化物修饰的阴极发光