电喷雾质谱地新原理和新技术.pdf

——一 蒸二童复g暾盛蒸堑璺盟堑瑾苤丝盟荭基篮 第一章 电喷雾质谱新原理和新技术的研究背景 虽然人们在三十年代就已发现液滴在电场中产生离子这一现象，六七十年 代开始研究其机理，但直到八十年代中后期，才有人提出并解决了t。电致喷雾 离子化装置”和质谱仪器的接口问题。这个设想在基因组学．蛋白组学所掀起的 Ionization 生命科技浪潮中日臻成熟，如今电喷雾质谱(ESi—MS，Electrosprav Mass Spectrometry)在生命分析科学领域己越来越凸现出举足轻重的作用。 er1．1电喷雾现象的发现和机理研究 1938年，Chapman在他的一系列论文中报道了“从带电液滴中蒸发产生离 子”的现象m”。当时的研究者多半只是把这～报道当作一种新奇的物理现象， 而并没有立即联想到其实际应用的价值和广阔的发展前景。因此之后相当长的 时间内并没有出现延续的工作报道。 各自对于电喷雾离子化现象的机理解释。Dole和他的追随者[4,7-101认为，当高度 带电的液滴形成后，其体积由于溶剂挥发而迅速减小；当液滴体积小到一定程 度以后，因为同性电荷相斥，会发生所谓“库仑爆裂”现象而产生更小的、从 而带电荷更少的液滴；这种爆裂反复发生，直至生成只带有一个溶质分子的纳 米级液滴：溶剂再从纳米级液滴中蒸发，最后导致溶质分子带上部分残余的液 滴电荷而形成离子。这种电离机理被称为“电荷残余模型”(CRM，Charged Residue 电喷雾离子化的历程应该用“离子蒸发模型”(IEM，Ion Model)来解 Evaporation 释。按照这一理论，虽然一开始带电液滴同样经过溶剂挥发过程不断减小体 积，但当液滴的体积足够小之后，电场力已经强大到足以使液滴中的溶质离子 “蹦”出液滴，从而发生所谓电离。若要形象地描绘以上提及的这两种机理的 区别，“电荷残余模型”中的离子生成可视为一个“被动”的过程，而“离子 蒸发模型”中的电离则是由离子“主动”地进入气相【91。 近十几年来，国际学术界围绕电喷雾离子化遵循何种机理的问题，可谓争 论不断【7．州。但由于缺乏合适的实验手段直接获得离子在电喷雾瞬间的电离的中 复二童生盟蒸复蕴蕴压堡塑笾毽：蕉丝理荭苣童 间产物，对该问题人们一直难下定论。最近又有一些研究组提出，电喷雾过程 中产生的气相离子可能就是原来液滴中存在的离子。这些溶液中的离子通过某 种还未被完全阐明的方式释放到气相中。因此，电喷雾电离产生的气相离子可 5】。 能和原来溶液中离子在液滴中的浓度平衡有关联[14-1 爿1．2电喷雾质谱的提出与实现 1984年，Fenn等第一次报道了电喷雾技术在质谱检测中的应用ⅢI，在此推 动下，溶液体系中多肽与蛋白质分析近年来取得了令人瞩目的成就。ESI是借 u 助强电场使分子电离，当样品溶液以低流速(1—20L／min)经毛细管流出 后，在雾化气的辅助作用下，雾化成很细的带电液滴。这种液滴在运动过程中 逐渐脱溶剂导致体积变小，表面电荷密度增大，当达到一定极限时，液滴爆 裂，产生更小的液滴。如此不断重复，直至当液滴很小时，由于液滴表面电荷 密度极大，足以从液滴中解析出分子离子，而后者最终射入质谱分析器。图l一1 给出电喷雾过程的主要步骤【l”。 ReductlOn几 }I E 图1．1电喷雾过程中的主要反应 (转载自参考文献[17])