细菌上清对酵母合成PHB能力的影响.pdfVIP

摘要 摘要 养不均衡条件下发酵生成的一种储存碳源和能量的胞内聚酯，是应用广泛的生物可降解 塑料。其中聚羟基丁酸酯(PHB)是PHA家族中的研究热点，它与石化塑料相似但又 具有生物可降解，生物相容性、表面可修饰性等优良性状，被称为“绿色塑料”，前景 广阔。从活性污泥驯化得到的高产PHB菌群中筛选出高产PHB的细菌和酵母，通过 “人工复配”的方法分析细菌的上清液对酵母合成PHB的促进作用。为挖掘酵母合成 PHB的潜力奠定实验基础，对酵母单菌株、菌群中酵母合成PHB代谢机理具有参考价 值。 通过尼罗蓝平板染色法初筛和气相色谱法测定PHl3含量复筛，从活性污泥驯化得 和酵母的26SrRNA菌种鉴定及系统发育树分析，分离获得的细菌主要有Kurthia、 Bacillus、Acinetobacter、Enterobacter 4个属。另外，获得多株酵母，其中优势酵母为 Rhodotorula、Candida、Geotrichumklebahnii，菌群中还存在酵母Pichia guilliermondii 和Meyerozyma 属于己报道高效合成PHB的菌属。 “人工复配”实验表明细菌发酵上清液对大多数酵母积累PHB有促进作用，其中 PHB的产量是纯酵母Y6的1．49倍。选取酵母 对酵母Y6影响最大，人工复配酵母Y6 Y1(Rhodotorula mucilaginosa)和酵母Y6(Pichia 添加细菌上清液后酵母在发酵过程中pH值、COD、细胞干重、总磷含量的动态变化与 h，此时酵母Y1高 PHB合成的关系，结果表明酵母高产PHB的最佳培养时间是54．56 h时达 快，吸磷和释磷的幅度变大，各指标均是向有利于合成PHB发展变化的。这些变化趋 势与细菌上清液罩的酶或代谢产物有关，是加入细菌上清液后促进酵母产PHB的原 冈。这也解释了酵母单独发酵产PHB含量低，而菌群中的酵母产：PHB较高，可能与菌 群中种问协作有关。对酵母进行透射电镜扫描，可直接观察到在体积较大的酵母细胞中 含有部分白色的PHB颗粒，胞内还有很多空间可以发展利用。 关键词聚羟基丁酸酯(PHB)；菌株分离；细菌； 酵母菌 万方数据 Abstract natural Polyhydroxyalkanoates(PHA)arethat凫rmented polyesters by as microorganisms intracellularcarbonand materialsunderexcess energystorage carbonandnutrientimbalance conditions．Itis used widely ofthePHA biodegradableplastics．As familv，PHBhasbeen part the focusandhot ofthe spot issimilarto study．Polyhydroxybutyrate