XXXX届高三生物一轮教师备课全书配套课件：现代生物科技.pptVIP

一、基因工程的基本工具 1．限制性核酸内切酶(简称：限制酶) (1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 (2)作用：识别特定的核苷酸序列并切开特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 (3)结果：产生黏性末端或平末端。 2．DNA连接酶 2．基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因等。 ①启动子： a．位置：位于基因的首端。 b．作用：是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质。 ②终止子： a．位置：位于基因的尾端。 b．作用：使转录在所需要的地方停止下来。 (2)构建目的： ①使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代； ②使目的基因能够表达和发挥作用。 3．将目的基因导入受体细胞 (1)转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 (2)常用方法(连线)： 　受体细胞　　　　　　　　导入方法 ①动物细胞　　　　　 a．农杆菌转化法 b．显微注射法 ②植物细胞 c．基因枪法 d．感受态细胞法 　 (Ca2＋处理法) ③微生物细胞 e．花粉管通道法 【提示】　①－b　②－a、c、e　③－d 4．目的基因的检测与鉴定 三、基因工程的应用 四、蛋白质工程 1．概念理解 (1)基础：蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系。 (2)操作：基因修饰或基因合成。 (3)结果：改造了现有蛋白质或制造出新的蛋白质。 (4)目的：满足人类的生产和生活的需求。 2．操作过程 从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)→基因表达→产生需要的蛋白质。 考点一　基因工程的基本工具 一、与DNA相关的酶 1．五种DNA相关酶的比较 2.限制酶和DNA连接酶之间的关系图示 (1)限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。 (2)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。 (3)限制酶是一类酶，而不是一种酶。 (4)DNA连接酶起作用时，不需要模板。 二、载体 1．作用： (1)作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。 (2)利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 2．具备的条件： 1．下图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是(　　) A．DNA连接酶、限制性内切酶、解旋酶 B．限制性内切酶、解旋酶、DNA连接酶 C．解旋酶、限制性内切酶、DNA连接酶 D．限制性内切酶、DNA连接酶、解旋酶 【解析】　使氢键断裂的是解旋酶；限制性内切酶将相邻两个核苷酸的磷酸二酯键断开；连接DNA片段间磷酸二酯键的是DNA连接酶。 【答案】　C 2.限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如图表示四种质粒和目的基因，其中，箭头所指部位为限制酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是(　　) 【解析】　由图可知，质粒B上无标记基因，不适合作为载体；质粒C和D的标记基因上都有限制酶的识别位点；只有质粒A上既有标记基因，且MunⅠ的切割位点不在标记基因上。 【答案】　A 考点二　基因工程的操作程序 一、目的基因的获取途径 1．从基因文库中获取：包括基因组文库和cDNA文库等。 2．人工合成目的基因的常用方法 (1)化学合成法：已知核苷酸序列的较小基因，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板。 (2)反转录法：以RNA为模板，在逆转录酶作用下人工合成。 3．通过PCR技术扩增目的基因 目的：利用DNA复制的原理在体外特异性的复制某DNA片段以获得大量的目的基因。 二、基因表达载体的构建 1．基因表达载体的组成：启动子、目的基因、终止子以及标记基因等。 2．基因表达载体的构建方法： 三、将目的基因导入受体细胞 四、目的基因的检测与鉴定 3．(2014·滨州一模)转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示(①至④代表过程，A至C代表结构或细胞)： (1)图中①过程用到的酶是______________，所形成的B叫做______________________，B是由________、________、目的基因和标记基因等部分构成。 (2)②过程常用__________________处理农杆菌，使之成为________细胞，利于完成转化过程。 (3)图中③过程叫做____________，④过程叫做________，将叶片培养成草莓幼苗的技术是____________。 (4)在分子水平上，可采用______