人教版高中生物选修三2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体同步课件.pptVIP

【易误警示】　(1)常用的病毒诱导剂有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等，其中仙台病毒最常用。 (2)用做诱导剂的病毒必须事先灭活，使病毒的感染活性、增殖能力丧失但不破坏病毒的抗原结构。 要点二　单克隆抗体的制备 1.单克隆抗体制备的关键思路及操作依据 (1)关键思路： ①克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群； ②将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细胞。 (2)用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因： ①每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体；不同种类的B淋巴细胞分泌的抗体不同; ②B淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖；骨髓瘤细胞能够无限增殖。 2.单克隆抗体制备过程中的筛选及原因 (1)第一次筛选是在B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后，因为有三种融合情况：B淋巴细胞与B淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，而只有B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞才是需要的杂种细胞。 (2)第二次筛选需先在多孔培养皿上培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生所需特异性抗体的细胞群。由于该细胞群是由单个杂交瘤细胞克隆来的，所以产生的抗体一定是化学性质单一、特异性强的单克隆抗体。 (2012·北京四中高二质检)1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请根据下图回答问题： 例2 (1)病原体注入小鼠体内后，要经过________细胞处理后形成抗原—MHC复合体，才能被免疫细胞识别。 (2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后以_________________________ ________________________________________________________________________________ 作诱导剂，使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养，获得的杂交瘤细胞具有_____________________________________ ______________________________________________________________________的特点。 (3)单克隆抗体的特点是________________________________________________________________________。 根据上图写出应用杂交瘤技术获得单克隆抗体的两种主要方法_____________________ _________________________________________________________________________。 解析：灭活的仙台病毒和聚乙二醇均可诱导动物细胞融合。杂交瘤细胞同时具有两个亲代细胞的遗传特性。可以在体外也可以在体内培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 答案：(1)吞噬(或巨噬) (2)灭活的仙台病毒或聚乙二醇　既能产生特异性抗体，又能无限增殖 (3)特异性强，纯度高(或：专一性强、灵敏度高)　体外培养法和动物体内培养法 变式训练 (2012·西宁五中高二检测)根据单克隆抗体制备流程示意图判断以下选项中正确的是(　　) A．单克隆抗体技术的原理包括细胞增殖、细胞膜的流动性、细胞的全能性等 B．根据培养基的物理性质分类，图中HAT培养基属于选择培养基 C．在制备单克隆抗体的过程中有两次选择，第一次是选择杂交瘤细胞，第二次是选择能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞 D．老鼠骨髓瘤细胞染色体数是40，效应B细胞的染色体数为46，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为86 解析：选C。单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞不能培育成个体，未体现细胞的全能性，A错；培养基根据物理性质可分为固体培养基和液体培养基等，按用途分为选择培养基、鉴别培养基等，B错；融合后杂交瘤细胞染色体数是86，DNA数要考虑细胞质中的DNA，多于86，D错；C项描述正确。 要点三　植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体制备) 融合前处理 纤维素酶、果胶酶除去细胞壁 注射特定抗原免疫处理正常小鼠 促融 ①物理法：离心、振动、电激 ②化学法：聚乙二醇 ①物理法：离心、振动、电激 ②化学法：聚乙二醇 ③生物法：灭活的病毒 理论基础 细胞的全能性、细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、细胞增殖 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体制备) 过程 原生质体的制备 原生质体的融合 杂种细胞的筛选与培养 杂种植株诱导与鉴定 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体制备) 意义和用途 ①克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围 ②应用：如白菜—甘蓝杂种植株 ①制备单克隆抗体 ②诊断