（全国通用版）2019高考生物二轮复习专题九现代生物科技专题考点1基因工程讲义.pptVIP

;1.基因工程的3种基本工具 (1)限制性核酸内切酶：识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。 (2)DNA连接酶：①E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端；②T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。 (3)载体：①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；②有一个至多个限制酶切割位点；③具有特殊的标记基因，以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。;提醒　(1)限制酶≠DNA酶≠解旋酶 限制酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列，并使两条链在特定的位置断开；DNA酶是将DNA水解为基本组成单位；解旋酶是将DNA的两条链间的氢键打开形成两条单链。 (2)使用限制酶的注意点：a.一般用同种限制酶切割载体和目的基因；b.不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。 (3)DNA连接酶≠DNA聚合酶 DNA连接酶连接两个DNA片段，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。;2.基因工程的操作流程 (1)目的基因的获取：①从基因文库中获取。②利用PCR技术扩增。③化学方法人工合成。 提醒 　①PCR技术扩增 a.原理：DNA双链复制。 b.条件：模板DNA、引物、游离的脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶。;②化学方法人工合成：已知核苷酸序列的较小基因，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板。 (2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建 ①基因表达载体的组成;②构建过程;提醒　①基因工程中的载体与细胞膜上的载体不同。 ②启动子、终止子 a.启动子(DNA片段)≠起始密码子(位于mRNA上)。 b.终止子(DNA片段)≠终止密码子(位于mRNA上)。 ③目的基因插入位置：启动子与终止子之间。 (3)将目的基因导入受体细胞 根据受体种类确定基因工程的受体细胞及导入方法。 ①植物：植物体细胞或受精卵——导入方法常用农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法(本法针对单子叶植物)。 ②动物：受精卵——导入方法为显微注射法。 ③微生物：细菌——导入方法为感受态法。;(4)目的基因的检测与鉴定的方法 ①检测目的基因是否导入受体细胞：DNA分子杂交技术。 ②检测目的基因是否转录出mRNA：分子杂交技术。 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原—抗体杂交技术。 ④个体生物学水平鉴定：根据表达性状判断。;3.蛋白质工程;1.(2018·全国Ⅰ，38)回答下列问题： (1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。该研究除证明了质粒可以作为载体外，还证明了___________________________________________________ ______________(答出两点即可)。;1;1;1;2.(2017·全国Ⅰ，38)真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题： (1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A，以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A，其原因是____________________________________ _____________________________________________________________。;1;1;1;1;1;1;1;1;4.(2018·湖北七市教科研协作体高三联考) 基因工程是从分子水平对基因进行操作，从而实现人们定向改造生物，得到人们所需要的生物性状或生物产品的技术。目的基因的获取是基因工程的第一步，常见的方法是构建基因组文库。请分析并回答下列问题： (1)构建基因组文库的一般步骤： ①提取某种生物体内的___________________，用适当的限制酶处理，得到一定范围大小的DNA片段； ②DNA片段分别与载体结合，得到重组载体； ③重组载体导入到________的群体中储存，基因组文库构建完成。;解析　构建基因组文库的一般步骤为： ①提取某种生物体内的全部DNA或全部基因，用适当的限制酶处理，得到一定范围大小的DNA片段； ②DNA片段分别与载体结合，得到重组载体； ③重组载体导入到受体菌的群体中储存，基因组文库构建完成。;1;1;解析　据题图分析可知，①表示从乙肝病毒中分离有关抗原基因；②过程包括基因表达载体的构建以及导入细菌；③可用特定抗体筛选含目的基因的细菌，并作为微生物发酵的工程菌。 由于肝细胞表面有乙肝病毒的受体，所以乙肝病毒专一侵染肝细胞。;解析　根据题意分析可知，乙肝病毒作为抗原的部分应该是其外壳蛋白和包膜蛋白，即通过基因工程生产的乙肝疫苗的有效成分是上述病毒蛋白中的Core蛋白和S蛋白。;a.若要获得大量的目的基因，可采用PC