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(全国通用版)2019高考生物二轮复习专题八生物技术实践考点1微生物的分离和培养讲义
;1.理清培养基制备与微生物纯化技术;(1)为了确定培养基的灭菌是否合格,微生物学实验一般会设置空白对照:随机取若干灭菌后的空白平板培养基在适宜条件下培养一段时间,观察培养基上是否有菌落生成。
(2)观察菌落需用固体培养基,因此培养基要添加琼脂。
(3)倒平板的温度一般在50 ℃左右,温度过高会烫手,温度过低培养基会凝固。
(4)平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又能防止皿盖上的水珠落入培养基,造成培养基污染。
(5)平板划线法只适用于微生物的提纯,不适合进行计数,并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。;(6)利用稀释涂布平板法估算水样中的活菌数的计算公式:(C÷V)×M(稀释倍数)。
(7)菌种可用甘油管藏法长期保存,保存时菌液中常添加一定量的甘油。
2.微生物分离与计数的两个实例
(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
①筛选菌株??利用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选菌株。
②测定微生物数量的常用方法:活菌计数法和显微镜直接计数法。
③过程:土壤取样→样品稀释→微生物的培养与观察。
④鉴定方法:含酚红指示剂的以尿素为唯一氮源的培养基→细菌→指示剂变红,则该菌能分解尿素。;(2)分解纤维素的微生物的分离
①实验原理:;1.(2018·全国Ⅰ,37)将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。回答下列问题:
(1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制______的生长,加入了链霉素的培养基属于_____培养基。;解析 培养基中的营养成分一般包括碳源、氮源、水和无机盐等。细胞中含有氮元素的生物大分子有蛋白质、核酸等,故所加入的氮源可参与以上物质的合成。;解析 能产生淀粉酶的微生物可将淀粉分解成麦芽糖,淀粉遇碘变蓝,向加有淀粉的培养基中加入碘液后培养基呈现蓝色,产淀粉酶的菌落周围的淀粉被水解,形成透明圈,可根据透明圈的大小判断产生淀粉酶的多少。;(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:
甲同???涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;
乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。
有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是________________________________________________________________。;1;2.(2018·全国Ⅱ,37)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题:
(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具______(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。;(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是________________________________________。;(4)水厂供应的自来水通常是经过_____(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。;1;3.(2016·全国Ⅰ,39)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下:
①配制培养基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);
②制作无菌平板;
③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;
④将各组平板置于37 ℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。;1;1;1;1;4.(2018·保山第二次统测)李斯特菌广泛存在于各类食品中,李斯特菌在李斯特菌显色培养基上培育时菌落会呈现蓝绿色。在目前发现的16种李斯特菌中单增李斯特菌是唯一对人有致病性的一种,与其他李斯特菌相比,单增李斯特菌还能合成并分泌磷脂水解酶,使培养基中的磷脂被分解而在单增李斯特菌菌落周围出现白色晕环。
(1)与单增李斯特菌相比,其他李斯特菌不能合成并分泌磷脂水解酶的原因是____________________________________________。;1;1;1;5.(2018·太原高三模拟)反刍动物如牛和山羊,具有特殊的器官——瘤胃,瘤胃中生活着多种微生物,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究,请回答下列问题:;解析 在样品稀释中需要使用无菌水稀释;在涂布平板操作中,需要使用酒精灯对涂布器进行灭菌,并在酒精灯火焰旁完成对培养皿涂布接种操作,所以从选项分析可知,显微镜和接种环不需要,故选CE。;解析 分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净以避免培养基污染棉塞。;(3)刚果红可与________形
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