宫内发育迟缓大鼠肾脏Wilms瘤1基因DNA甲基化与蛋白尿关系.PDFVIP

·２２８· ＣｈｉｎＪＥｖｉｄＢａｓｅｄＰｅｄｉａｔｒ　Ｊｕｎｅ２０１３，Ｖｏｌ８，Ｎｏ３ ·论著· ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３５５０１．２０１３．０３．０１５ 宫内发育迟缓大鼠肾脏 Ｗｉｌｍｓ瘤１基因 ＤＮＡ甲基化与 蛋白尿关系 １ １ 陈　径 　匡新宇 　徐　虹　沈　茜　汤小山 　　摘要　目的　观察宫内环境对肾脏Ｗｉｌｍｓ瘤１（ＷＴ１）基因甲基化状态的影响及其与肾脏功能的关系，探讨宫内环境 引发肾脏疾病的可能分子机制。方法　采用孕期全程低蛋白饮食法建立宫内发育迟缓（ＩＵＧＲ）大鼠模型，至自然分娩。对 照组以孕期常规饲料饲养至自然分娩。１２周龄时，比色法测定２４ｈ尿蛋白定量，光镜下计数肾小球数目，实时ＰＣＲ方法 检测肾脏 ＷＴ１基因ｍＲＮＡ水平及甲基转移酶ＤＮＭＴ１、ＤＮＭＴ３ａ和ＤＮＭＴ３ｂｍＲＮＡ水平，ＭａｓｓＡＲＲＡＹ定量分析检测 ＷＴ１ 基因启动子区ＤＮＡ甲基化状态。结果　 ＩＵＧＲ组新生鼠出生体重显著低于对照组（Ｐ＜０．０００１），直至１２周龄时体重仍 ① 低于对照组（Ｐ＝０．０４３）。 与对照组相比，１２周龄时ＩＵＧＲ组大鼠２４ｈ尿蛋白定量显著升高（Ｐ＝０．０１６）；血清胱抑素Ｃ ② 水平显著升高（Ｐ＝０．０３６），肾小球数目显著下降（Ｐ＝０．００１）。 与对照组相比，１２周龄时ＩＵＧＲ组大鼠肾组织ＷＴ１基因 ③ ｍＲＮＡ的表达显著增高（Ｐ＝０．０４７），ＷＴ１基因启动子区甲基化水平显著降低（Ｐ＝０．０２９），并且其 Ｍ１段甲基化水平与 ＷＴ１基因ｍＲＮＡ的表达呈负相关（ｒ＝－０．９３９，Ｐ＝０．０００１），ＤＮＭＴ１和ＤＮＭＴ３ｂｍＲＮＡ表达水平也显著下降（Ｐ值分别为 ０．００３和０．０１０）。结论　不良的宫内环境可以影响大鼠肾脏 ＷＴ１基因的甲基化状态，继而导致其异常表达，可能参与了 ＩＵＧＲ大鼠成年期蛋白尿的发生。 关键词　宫内生长迟缓；　肾脏；　ＤＮＡ甲基化；　Ｗｉｌｍｓ瘤１基因；　大鼠 ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＷＴ１ＤＮＡｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｕｒｉａｉｎｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅｇｒｏｗｔｈ ｒｅｔａｒｄａｔｉｏｎｒａｔ １ １ ＣＨＥＮＪｉｎｇ，ＫＵＡＮＧＸｉｎｙｕ，ＸＵＨｏｎｇ，ＳＨＥＮＱｉａｎ，ＴＡＮＧＸｉａｏｓｈａｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｐｈｒｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｌｄｒｅｎ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＦｕｄａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１１０２，Ｃｈｉｎａ；１Ｅｑｕａｌｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｔｏｔｈｉｓｓｔｕｄｙ） ＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇＡｕｔｈｏｒ：ＸＵＨｏｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｈｘｕ＠ｓｈｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｏｎＤＮＡｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｓｔａｔｕｓｏｆＷｉｌｍｓ′ｔｕｍｏｒ ｇｅｎｅ１（ＷＴ１）ｉｎｔｈｅｋｉｄｎｅｙａｎｄｒｅｎａｌｆｕｎｃｔｉｏｎ，ａｎｄｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｂｙｗｈｉｃｈｔｈｅｆｅｔａｌｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｌｅａｄｓｔｏｐｏｓｔｎａｔａｌｋｉｄｎｅｙｄｉｓｅａｓｅｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＡｒａｔｍｏｄｅｌｏｆｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅｇｒｏｗｔｈｒｅｔａｒｄａｔｉｏｎ（ＩＵＧＲ）ｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙｍａｔｅｒｎａｌ ｌｏｗｐｒｏｔｅｉｎｄｉｅｔｔｈｒｏｕｇｈｏｕｔｐｒｅｇｎａｎｃｙ．Ａｔ１２ｗｅｅｋｓｏｆａｇｅ，２４ｈｏｕｒｕｒｉｎｅｐｒｏｔｅｉｎｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄ，ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｎｕｍｂｅｒｗａｓｃｏｕｎｔｅｄ ｗｉｔｈｔｈｅｌｉｇｈｔｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，ｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲｗａｓｕｓｅｄｔｏｔｅｓｔｔｈｅｍＲＮＡｌｅｖｅｌｓｏｆＷＴ１ａｎｄｔｈｅｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓ，ｓｕｃｈａｓＤＮＭＴ１， ＤＮＭＴ３ａａｎｄＤＮＭＴ３ｂ．ＭａｓｓＡＲＲＡＹｗａ