多器官功能障碍综合征患者血清对内皮细胞氧化损伤的-中国急救医学.PDFVIP

·38· 多器官功能障碍综合征患者血清对内皮细胞氧化 损伤的影响及还原型谷胱甘肽的保护作用 张哲英， 张蓓， 秦静， 甄玲玲， 马 莉 基金项目：兰州大学中央高校基本科研业务费专项资金(1zujbky一2012—200) 作者单位：730030甘肃兰州，兰州大学第二医院急救中心危重病科 作者简介：张哲英(1986一)，女，硕士研究生。 通讯作者：马莉(1970一)，女，主任医师，硕士生导师，E—mail：malill05@126．com。 [摘要] 目的探讨多器官功能障碍综合征(multipleorgandysfunctionsyndrome，MODs)患 umbilicalveinendothelial 者血清对人脐静脉内皮细胞(human cells，HuVEc)氧化损伤的影响及外 源性还原型谷胱甘肽(reducedglutathione，GsH)的保护作用。方法选择MODs患者20例，用其 血清对HuVEc进行干预，建立体外细胞损伤模型，同时以健康血清组和胎牛血清组作对照，将细 胞分为正常对照组(A组)、健康血清组(B组)、MODs血清损伤组(MODs患者血清浓度分别为 C1组5％、c2组10％、c3组20％)和GSH干预组(10％MODS患者血清细胞培养基中GSH终浓 mmoL／L、D2组0．32mmoL／L、D3组1．6mmoL／L、D4组8．OmmoL／L、D5组40 度分别为D1组0．064 mmoL／L)。采用MTT法检测各组细胞生存率；荧光倒置显微镜下观察B组和c2组HuVEC形态 学变化；分别检测B组、c2组和D3组药物干预24、48、72h后细胞上清液超氧化物歧化酶 (sOD)、过氧化氢酶(cAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GsH—Px)活力和总抗氧化能力(T—AOc)水 平，同时用流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(R0s)水平。结果①B组细胞生存率与A组比较 差异无统计学意义(P0．05)，cl、c2、c3组细胞生存率较B组明显下降(P0．05)，D2、D3、D4 组细胞生存率较c2组明显升高(P0．05)；②c2组HuVEc显微镜下可见损伤性改变，细胞变大 变圆、界限模糊、胞体碎裂、部分细胞脱落；③c2组细胞培养上清液s0D、cAT、GsH—Px活力及 T—AOC水平较B组下降，而D3组各时间点较c2组均明显升高，其中以药物干预72h后升高更 明显；④c2组细胞内R0s水平较B组明显升高，D3组各时间点ROs水平较c2组明显降低，其中 以药物干预72h后下降最明显。结论MODs患者血清可造成内皮细胞损伤，GsH可通过提高 s0D、cAT、GsH—Px活力及T—A0c水平，降低细胞内R0s水平，从而发挥内皮细胞保护作用，减 轻血管内皮细胞的氧化损伤。 [关键词]多器官功能障碍综合征(MoDs)；氧化应激；还原型谷胱甘肽(GSH)； 人脐静脉内皮细胞(HUVEc) doi：10．3969／j．issn．1002—1949．2015．01．009 of the culturedMoDSser哪inv舔cular Protectivee脏ctSGSH o】!【idative agaimt d枷age by endothelial cells删AⅣG劢e—yi昭，Z^MⅣG曰ei，Q，Ⅳ如w，e￡oZ．Dep。n舢n￡可E氍—ge唧 觑fe凇i钾∞re‰n，如凡抚oM踟如e倦毋Seco以舶印删，如，砒oH730030，∞i眦 the to oxidative inhumanumbilicalveinendothelial [Abstract]objectiveinvestigate damage inthe selllmwith cells(HUVEcs)culturedpatient multipleorgandysfunctionsyndmme(MODS)and the effectsofreduced theendothelial MethodsMODS protective 91utathione(GSH)ondysf