电针百余、四神的聪mcao模型大鼠nogo-a、camll表达及学习记忆能力的影响.docxVIP

四刖医抖太堂亟±堂位论塞目 四刖医抖太堂亟±堂位论塞 目 录 1 电针百会、四神聪对MCAO模型大鼠Nogo．A、CaMK II表 达及学习记忆能力的影响 1 1．1 中文摘要 1 1．2 英文摘要 4 1．3 前言“ 一．． 一一一一 “· ·· · ··一9 1．4 材料与方法 11 1．5 结果 22 1．6 讨论·· ·· · · · · · ··· · · · · ··42 1．7 结论·· · ···-· 一 ··· · · ·········· · · · · ··50 1．8 参考文献 51 1．9 英汉缩略词对照表 62 2 致谓} · ······· · ······· · ····· · ·· · · · ··63 3 针灸治疗脑梗死后认知功能障碍的研究现状(综述) 64 万方数据 电针百会、四神聪对MCAO模型大鼠海马区Nogo—A、CaMK 电针百会、四神聪对MCAO模型大鼠海马区Nogo—A、 CaMK II表达及学习记忆能力的影响 摘 要 目的：本实验通过制做大脑中动脉闭塞脑梗死(middle cerebral artery occlusion，MCAO)大鼠模型模拟脑卒中后认知功能障碍(post stroke cognitive impairment，PSCI)，观察电针百会、四神聪穴对MCAO 模型大鼠Morris水迷宫(Morris water maze，MWM)测试成绩及海 马区Nogo．A、CaMKII蛋白表达的影响，从宏观行为到微观细胞和 分子等多水平上探讨电针治疗PSCI学习记忆障碍可能的作用机制， 并为针灸治疗PSCI提供理论和实践依据。方法：(1)对象筛选及分组： 用MWM实验筛选出84只无学习记忆障碍大鼠；随机分为正常组 (n=12)、模型组(n=24)、假针刺组(n=24)、电针组(n=24)，4 组又随机分为1d、7d、14d和28d共4个时点进行观察的4个亚组； 除正常组外的3组大鼠均采用照改进后的Longa方法制作左侧 MCAO模型；评价后造模成功的大鼠纳入试验，不成功者剔除并补 组。(2)干预措施：正常组及模型组常规喂养，不给予任何处理，但 在其它组实验时同等条件抓取；电针组给予针刺并加电针；假针刺组 针灸针固定于穴位外而不刺入；针刺选穴“百会”、“四神聪”。(3) 观察指标：除MWM实验在造模后第7d、14d、28d进行外，余各项 指标的观察均在第1d、7d、14d、28d共4个时点进行。①大鼠行为 学MWM实验，包括定位航行试验及空间探索试验；②水迷宫试验 万方数据 后取材进行HE染色观察大鼠海马脑组织病理学变化：③采用免疫组化检测脑梗侧海马区Nogo—A的表达；④采用免疫组化检测脑梗侧海 后取材进行HE染色观察大鼠海马脑组织病理学变化：③采用免疫组 化检测脑梗侧海马区Nogo—A的表达；④采用免疫组化检测脑梗侧海 马区CaMK II的表达。(4)统计学处理：所得计量数值采用均数4-标准 差(X+S)表示；实验数据采用IBM SPSS Statistics 1 9．0软件进行统 计分析；以P0．0为具有统计学意义，并且以Po．01为显著统计学 意义；定位航行试验数据采用重复数据的多因素方差分析的方法，空 间探索试验数据采用单因素方差分析进行分析；免疫组化染色数据用 单因素方差分析方法；并对数据行线性相关分析；将所有数据及分析 结果采用GraphPad Prism 5软件绘制成图。结果：①行为学MWM 测试：模型组大鼠在定位航行试验和空间探索试验中均表现出明显的 学习记忆障碍，电针组大鼠在两类行为学测试中成绩均明显优于模型 组和假针刺组(尸0．05)，模型组与假针刺组MWM测试结果无统计学 差异(尸O．05)；②Nogo．A表达免疫组织化学染色结果：通过免疫组 化检测Nogo．A阳性产物平均光密度值，电针治疗7d、14d和28d后 Nogo．A表达降低，和正常组、假针刺组相比，差异具有显著意义(P O．01)。模型组与假针刺组Nogo．A的表达无统计学差异(胗O．05)； @CaMKII表达免疫组织化学染色结果：模型组CaMKII阳性产物平 均光密度值低于正常组(P／o．01)，电针治疗7d、14d和28d后可增 加CaMKII的表达，和正常组、假针刺组相比，差异具有显著意义(P O．01)。模型组与假针刺组CaMKII的表达无统计学差异(尸0．05)； ④行为学MWM测试成绩与Nogo．A表达呈负相关，行为学MWM测 试成绩与CaMKII表达呈正相关，Nogo．A表达与CaMKII表达呈负 万方数据 四刖医抖太堂硒±堂僮j金塞相关。结论：本研究通过制作PSCI模型，观察电针“百会、四神聪 四刖医抖太堂硒±堂僮j金塞 相关。