电针对兔膝骨关节炎到滑膜hif-1α和vegf表达的影响.docxVIP

四川医科大学硕士学位论文目 四川医科大学硕士学位论文 目 录 1 电针对兔膝骨关节炎滑膜HIF一1 a和VEGF表达的影响 1．1 中文摘要 l 1．2 英文摘要 4 t．3 前言 9 1．4 材料与方法 13 1．5 结果 20 1．6 讨{仑 32 1．7 结论 41 1．8 参考文献 42 1．9 英汉缩略词对照表 49 2 致谢 50 3 早期膝关节骨性关节炎的康复治疗进展(综述) 万方数据 四川医科大学硕士学位论文电针对兔膝骨关节炎滑膜 四川医科大学硕士学位论文 电针对兔膝骨关节炎滑膜 F-1 a和VEGF表达的影响 摘 要 目的：膝骨关节炎(knee osteoarthritis，KOA)是一种以关节退行 性病变为主要改变的常见老年慢性骨关节疾病。据研究表明，膝关节 处于生理性的低氧环境。在低氧环境中，缺氧诱导因子．1(hypoxia— inducible factor一1，HIF．1)有着重要调节功能并在缺氧状态下发挥作 用，它是一种核转录因子，可调控其他基因转录，同时也是一种DNA 结合蛋白。HIF．1 0c和HIF．1B是构成HIF一1的两个亚基，前者是HIF一 1中调节缺氧特有的调控亚基。HIF一1 0【在关节处于严重缺氧环境时， 表达增多发生累积，并由细胞浆内转移至核内，与其重要的靶基因血 管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的DNA结 合，导致其表达增高。随着近年来研究的不断深入，慢性滑膜炎继软 骨及软骨下骨的研究之后成为KOA发病机制的研究热点。手术治疗 和非手术治疗是KOA主要的两大类治疗方法，其中电针治疗是临床 上运用较多的一种非手术治疗方法。电针治疗将传统的针灸与电刺激 结合起来，针灸可刺激KOA患者穴位，促进机体释放镇痛物质，而 电流通过针刺可使肌肉收缩，调整肌张力，改善局部的血液循环，促 进损伤的修复。因此，本实验应用电针治疗KOA的动物模型，通过 肉眼和HE染色观察滑膜及软骨标本形态变化和病理改变，免疫组化 方法比较治疗前后HIF．1 0【、VEGF的表达变化，在细胞和分子层面上 初步探讨运用电针治疗兔KOA的疗效及可能的作用机制。方法：(1) 万方数据 四川医科大学硕士学位论文材料和干预措施：雄性新西兰大白兔35只(5只备用)，30只随机分 四川医科大学硕士学位论文 材料和干预措施：雄性新西兰大白兔35只(5只备用)，30只随机分 为三组，对照组10只，不作任何处理，模型组和电针组各10只，参 照Videman法用石膏将左后肢膝关节于伸直位固定，建立兔KOA模 型。电针组于造模6周后，选取兔左下肢四个穴位即足三里、梁丘、 阳陵泉、血海，于每天同一时间给予电针治疗，治疗时间为30分钟， 持续治疗15天，其余两组于每天相同时间固定30分钟。15天后空 气栓塞法处死三组动物，手术切开左膝关节进行大体观察，再以手术 刀片切取关节滑膜，制作切片。给予HE染色、免疫组化检测和光镜 观察。按滑膜病理学评分标准评分，将所得评分和检测数据进行统计 学分析。(2)观察指标：①大体观察三组实验兔的左膝关节形态改变； ②将兔左膝关节滑膜切取少许后，经固定、包埋、切片，染色后观察 有无增生的滑膜细胞、纤维组织和血管，滑膜下层炎症程度情况，并 按照滑膜病理学评分标准对三组标本进行评分。③免疫组织化学分 析：用免疫组化试剂盒检测各组实验兔关节滑膜细胞中HIF。la和 VEGF的表达情况，并在光镜下进行观察。(3)统计学处理：统计学 分析软件采用IBM SPSS Statistics 1 9．0，所得计量数值采用；±S表示， 多组之间比较采用单因素方差分析，两两比较选用LSD—f检验，等级 资料用秩和检验，相关性用直线相关分析，PO．05为差异具有显著 性意义。结果：(1)各组膝关节大体观察：对照组，左膝关节没有出 现充血及肿胀，关节液无浑浊，滑膜质地均匀，无增厚、水肿，关节 软骨色泽半透明光滑；模型组9只兔关节肿胀、明显充血，关节液出 现淡黄色浑浊改变，滑膜增厚明显，与股骨粘连，软骨光泽度和透明 万方数据 四川医科大学硕士学位论文度降低，色泽灰暗，部分软骨外表有缺损及突起，部分软骨剥脱，软 四川医科大学硕士学位论文 度降低，色泽灰暗，部分软骨外表有缺损及突起，部分软骨剥脱，软 骨下骨外露，关节面较粗糙；电针组仅3只可见关节腔内积液，且量 较模型组少，部分滑膜表面有少许增厚，滑膜外观光滑，光泽度较对 照组差但优于模型组。(2)滑膜细胞HE染色病理学观察评分：三组 病理学评分比较有显著性差异(Po．05)。(3)滑膜免疫组化检测 结果：在显微镜下，HIF—la和VEGF的阳性表达为棕黄色或棕褐色 颗粒状物。对照组HIF．10t和VEGF呈弱阳性表