实习五 健康筛查医学培训课件.ppt

血红蛋白测定 实习目的 了解血红蛋白测定原理 熟悉测定试剂配制方法 掌握测定仪器操作方法 知识准备 使用器材：刺血针、消毒敷料用品、血红蛋白吸管、带塞试管、棕色试剂瓶、72l系列分光光度计。 检测试剂：文齐氏浓缩试剂盒。包括氰化高铁血红蛋白浓缩液和氰化高铁血红蛋白校正液。 检测方法：使用WHO推荐的氰化高铁血红蛋白测定法（具体检测方法参照试剂盒说明）。 检测原理 按氰化高铁血红蛋白文齐氏液测定法配制成试剂Ⅰ和试剂Ⅱ； 血液在试剂中溶解出血红蛋白，先与高铁氰化钾化合成高铁血红蛋白； 再与氰化钾结合成稳定的氰化物； 换算为血液血红蛋白总浓度。 试剂配制 取800ml蒸馏水； 打开试剂Ⅰ倾入混合； 接着打开试剂Ⅱ倒入，再混合并用蒸馏水加入至1000ml充分混合； 储存于阴凉暗处或放冰箱（此液可保存一个月）。 试剂存放：试剂原液至少可保存一年，应放至阴凉处或4～8℃冰箱，取出稀释应用液，须在一个月内用完。　 测试操作 吸取5.0ml应用试剂置于试管内； 加20μl血液，充分混匀； 待放五分钟，完全反应后用540nm波长光电比色检测（各种比色计均可应用，单机也可使用）。 经用参考液或校正验证仪器合格后方可使用。 浓度值变换可用系数计算，或查血红蛋白曲线表，或血红蛋白浓度直读。 比色与计算 比色：721型分光光度计调波长540 nm，以任一浓度检验OD读数是否在误差允许范围之内。若在误差允许范围内即可测定样品。 计算和报告结果： 用公式Hb(g/L)＝OD×k (常数) 计算血红蛋白值，结果填入检测卡片的相应方格内。 注意事项 1.人体血红蛋白含量在一天内有生理波动，应注意采血时间对结果的影响。 2.一定要采用一次性刺血针，严防交叉感染。 3.仪器在测试前均需校正。 4.低血红蛋白诊断标准： 7～13岁血红蛋白低于120g/L； 14岁以上男性低于130g/L； 14岁以上女性低于120g/L。