高三尖杉酯碱对人白血病细胞jak2空-stat5相关信号通路的影响及其机制的研究.docxVIP

浙 江 浙 江 大 学 医 学 院 2 00 6 级 硕 士 研 究 生 毕 业 论 文 高 三 尖 杉 醋 碱 对 人 白 血 病 细 胞 JA KZ 一ST AT S 信 号 通 路 的 影 响 及 其 机 制 的 研 究 浙 江 大 学 医 学 院 内科 学 ( 血 液 病 ) 20 06 级 硕 士 研 究 生 任 艳 玲 导 师 侮 红 艳 副 主 任 医 师 摘 要 许 多 细 胞 因 子 和 生 长 因 子 通 过 J AK / S TA T 途 径 传 导 信 号 ， 其 中 JA KZ 与 造 血 关 系 最 为 密 切 ，S T A TS ( 信 号 转 导 子 与 转 录 激 活 子 ) 是 JA KZ 最 主 要 的 下 游 信 号 蛋 白 。 S T A T S 被 JA KZ 磷 酸 化 后 形 成 二 聚 体 ， 进 入 核 内 ， 调 节 相 关 基 因 的 转 录 ， 维 持 细 胞 的 生 长 分 化 与 增 殖 。 急性 髓 系 白血 病 常 与 染 色 体 异 常 以及 致癌 蛋 白的形 成 密 切 相 关 ，它们 激 活恶 性 细 胞 存 活 与 增 殖 的 信 号 转 导 途 径 。在 这 些 信 号 转 导 途 径 中 ，某 些 基 因 的 过 渡 表 达 或 突 变 引 起 的 JA KZ 一ST AT S 信 号 途 径 的 持 续 激 活 对 髓 系 原 始 细 胞 的 恶 性 转 化 犹 为 重 要 ， 因 此 药 物 阻 断 J A KZ 一S TA TS 信 号 途 径 进 而 抑 制 A M L 细 胞 的 恶 性 增 殖 己经 成 为 A ML 靶 向 治 疗 的 重 要 组 成 部 分 。高 三 尖 杉 醋 碱 是 一 种 具 有 抗 白血 病 活 性 的 植 物 碱 ， 自二 十 世 纪 七 十 年 代 以 来 ，在 中 国 己经 广 泛 应 用 于 急 慢 性 白血 病 和 骨 髓 异 常 增 生 综 合 症 的 治 疗 ，并 取 得 显 著 疗 效 。尽 管 几 个 细 胞 学 事 件 己经 确 定 与 其 抗 白 血 病 效 应 相 关 ， 包 括 : 抑 制 蛋 白合 成 和 端 粒 酶 活 性 ， 下 调 Mc l一1，S ur v iv in ， 内 皮 生 长 因 子 等 与 细 胞 的 恶 性 密 切 相 关 的 因 子 的 表 达 ，上 调 前 凋 亡 蛋 白 B a x 的 表 达 和 C as p as e 一3 介 导 的 PA 即 的 剪 切 等 等 ，但 H HT 对 J A K Z 一S T A T S 信 号 转 导 通 路 的 影 响 的 相 关 研 究 尚 未 见 报 道 。 我 们 的 研 究 中 ， 分 离 A M L 病 人 骨 髓 单 个 核 细 胞 ， 与 0 ， 2 0 ， 4 0 ， 8 0 n g / m l 的 H H T 共 同 培 养 4 8 小 时 后 采 用 M T T ( 3一 ( 4 ，5 一d 1m e t h y l t h ia z o l一2 一y l ) 一2 ， 5一d ip h e n y l t e lr a 一z o l iu m b r om id e ) 比 色 法 观 察 H H T 对 A M L 原 代 细 胞 的 生 长 抑 制 作 用 ， 结 果 发 现 : H HT 对 A M L 病 人 原 代 细 胞 具 有 显 著 生 长 抑 制 作 用 ， 呈 浓 度 依 赖 浙 浙 江 大 学 医 学 院 2 0 0 6 级 硕 士 研 究 生 毕 业 论 文 性 (20 ， 4 0 ， 8 0 n g /m l 的 H H T 的 抑 制 率 分 别 为 16 .4 9 士 2 . 7 0 % ， 2 4 . 8 1 士 5 .4 9 % ， 47 .58 士4 . 3 1 % ) ，对 健 康 者 骨 髓 抑 制 作 用 不 明 显 (抑 制 率 分 别 为 5 .56 士 1. 37 % ， 7.4 1 士2 . 13 % ，12 . 0 4 士 3 .2 1 % ) 。进 一 步 研 究 H HT 对 A M L 细 胞 株 H E L ，K 56 2 ，H L 一6 0 的 生 长 抑 制 作 用 :H H T 对 H EL 作 用 48 小 时 的 半 数 抑 制 浓 度 ( IC 50 )为 64 . 74 ng /m1 ， 对 K 5 6 2 细 胞 的 半 数 抑 制 浓 度 为 1 16 .s ng /m1 ，H L 一60 为 77 .3 ng /ml . 我 们