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“血小板卫星现象”对计数的影响
钟国梁
使用EDTA-2K抗凝,少数患者血涂片尾部可以看到簇状聚集的血小板,有时还可以看到血小板粘附于白细胞周围,形成所谓的“血小板卫星”,导致血细胞分析仪计数的血小板偏低。
血小板聚集为团块状 血小板在中性粒细胞周围形成卫星现象
EDTA诱导血小板卫星现象(platelet satellitism),引起假性血小板减少即EDTA依赖性血小板减少症(PTCP)应该受到广泛重视,临床发生率约为0.09%-0.21%。
由于用EDTA盐(EDTA盐干粉抗凝剂,乙二胺四乙酸)干粉抗凝剂,在作为免疫介导的血液中,可出现的冷抗血小板自身抗体,使血小板互相凝集现象。这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体,直接作用于血小板膜糖蛋白IIb/IIIa上。同时,这种与血小板结合的自身抗体Fc端可与单核细胞或淋巴细胞膜上Fc受体结合,出现卫星现象。引起血小板聚集出现卫星现象后,在全自动血细胞计数仪上检测时,发生假性血小板计数减少的现象。
原因有以下几点:
1.凝出现问题。可能是抗凝比例不对,过高会导致卫星现象。
2.放置时间过短,这也是在25分钟之内测试分类不好血小板不稳的重要原因,EDTA抗凝剂与血小板凝血因子反应结合需要时间,这个时间随着温度的升高而缩短,这也就是天气变冷的时候容易出现问题的原因。
3.“血小板卫星现象”的原因还与血小板表面存在某种隐匿性抗原有关。只有当EDTA存在的条件下,机体的IgG 或者IgM抗体可以对血小板的某些表位发生反应。EDTA可引起血小板糖膜(GP)发生改变,即血小板形态发生变化,由正常的圆盘状变为圆球形,改变了血小板膜表面某种隐匿性抗原构象。部分病人血浆中存在的某种自身抗体与这种改变构象的抗原结合后的抗原抗体复合物激活了细胞膜中的磷酯酶,使血小板膜水解并释放胶原、凝血酶原等血小板活性物质。这些血小板活性物质都能不同程度的活化血小板纤维蛋白原受体(FIR-B),促使血小板与纤维蛋白原受体结合后聚集成团,导致血小板假性减少。
血小板在体外明显簇集不多见,但一旦发生即可引起血小板减少,发生假性血小板计数减少的现象,这种现象会导致临床增加其他不必要的辅助检查,甚至引起临床误诊、误治。因而,若对临床上无任何出血症状与体征、出血和凝血时间正常而血细胞分析仪计数出现血小板异常低值时,可进行血涂片做瑞氏染色镜检,观察血小板有无聚集现象,正常血小板分布应该三五成群、散在分布,同时采末梢血用血小板稀释液稀释并充池作血小板手工计数来校正。
对于这种假性血小板减少,这种情况的发生于疾病无特殊的相关性,既可以见于正常人,也可以见于病人。
因此在做血常规时,若血小板计数低时,有可能是血小板聚集成堆或大血小板被血细胞分析仪误计为红细胞,可结合RBC、PLT直方图的相关参数来判断:正常血小板主要集中在2~20fl范围内,通常在2~30fl范围内分析血小板。由于血小板与血细胞在同一通道内测量,而两者在体积有明显的差异,故仪器设定了特定的阈值,将高于阈值者定于红细胞,反之为血小板。①大血小板直方图:曲线峰右侧右移,在大于30fl的某一点与横坐标重合,MPV值明显增高。②聚集的血小板直方图:曲线峰变低,如果标本中血小板以轻度聚集为主,曲线峰右侧抬高呈拖尾状,不与横坐标重合。此时血小板计数值高低不一,通常与未发生聚集时血小板数有关。此时应推片镜检观察血小板形态并做血小板人工计数,以免误报结果。
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