三食品中细菌总数及大肠菌群的检测.pptVIP

实验四 食品中细菌总数及大肠菌群的检测 一、目的要求 1、掌握食品中微生物学基本指标的检测方法。了解食品质量与细菌和大肠菌群数量的重要关系 2、通过实验，初步掌握食品中污染的活细菌计数方法，以判别食品的卫生质量 一、待测样品： 奶粉还原液、豆腐等。 二、培养基平板计数琼脂培养基、月桂基磺酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）、煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）, 225m1无菌生理盐水、 9m1无菌生理盐水、1mol/L氢氧化钠、1mol/L盐酸。 三、无菌培养皿、革兰氏染色液、移液器、枪头、培养箱、水浴锅、电子天平、电炉、玻璃珠（直径为5mm）、试管架、酒精灯、灭菌镊子、75%酒精棉球、玻璃蜡笔、不锈钢勺等。 四、操作方法 一、细菌总数： (1) 以无菌操作将检样25克(或25ml)放于装有225ml灭菌生理盐水和玻璃珠的三角瓶中，充分振荡制作成1:10的均匀稀释液，样品PH值应在6.5-7.5之间，必要时用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸调节(固体食品需先用无菌均质器均质后再稀释)。 (2) 用移液器，吸取1:10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内，振摇均匀，制成1:100的稀释液。 (3) 另取枪头，按上述操作进行10系列稀释成不同浓度的稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支无菌枪头。 (4) 根据对标本污染情况的估计，选择2-3个稀释度，分别在作1