抗生素药物的分析.ppt

[鉴别] （1）取本品约0.5mg，加硫酸2ml即显蓝色，渐变为橄榄绿色；加水1ml后，显金黄色或棕黄色。 （2）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 （3）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集370图）一致。 （4）本品的水溶液显氯化物的鉴别反应（附录Ⅲ）。 [检查] 酸度 有关物质 取盐酸四环索对照品和4-差向金霉素对照品，精密称定，加0.01mol/L。照含量测定项下的色谱条件。液相色谱仪，记录色谱图。含4-差向金霉素不得过4.0%，含盐酸四环素不得过8.0%。其他各杂质峰面积的和不得大于对照品溶液中4-差向金霉索峰面积的0.375倍（1.5%）。 杂质吸光度： 在460nm的波长处测定，其吸光度不得过0.40。 干燥失重 [含量测定] 照高效液相色谱法（附录V D）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂：高氯酸-二甲基亚砜-水（8∶525∶467）为流动相（pH2.0）；柱温45℃；检测波长为280nm。取盐酸金霉素、盐酸四环素和4-差向金霉素对照品各适量，加0.01mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中分别含1mg的混合溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，出峰顺序依次为盐酸四环素、4-差向金霉素、盐酸金霉素。四环素峰与4-差向金霉素峰，4-差向金霉素峰与金霉素峰间的分离度均应符合要求。 测定法 取本品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中,加0.0lmol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20μ1注入液相色谱仪.记录色谱图；另取盐酸金霉素对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。 [类别] 四环素类抗生素。 [贮藏] 遮光，密封，在干燥处保存。 [制剂] （1）盐酸金霉素软膏 （2）盐酸金霉素眼膏 1、管碟法测定抗生素的效价实验中， 与抑菌圈面积或直径成正比；扩散系数D增大，抑菌圈直径 、扩散时间T增长，抑菌圈直径 、最低抑菌浓度C越小，则抑菌圈直径 ，培养基厚度H增加，则抑菌圈直 径 。 2、抗生素效价微生物检定法包括 、 、 。 3、多肽类抗生素的鉴别反应主要包括 、 、 。 4、链霉素的呈色反应主要包括 ， ， 、 、 。 5、四环素的主要杂质包括 、 、 ，可用薄层层析加以分离。 6、青霉素的过敏原主要包括 、 。 7、四环素可与三氯化铁反应显红棕色，其原因是四环素含有下列的那个基团？ （ ） A、胍基 B、苯 C、酚羟基 D、氨基 8、在坂口反应中，链霉胍，8-羟喹啉分别与下列哪个物质反应，其各自的产物在相互作用生成橙红色化合物。 （ ） A、次溴酸钠 B、溴 C、硫酸 D、盐酸 9、下列哪个抗生素没有茚三酮呈色反应 （） A、红霉素 B、青霉素G C、短杆菌肽 D、链霉素 第四节 抗生素效价微生物检定法 一、稀释法 二、比浊法 三、琼脂扩散法 管碟法原理及操作步骤： 影响抑菌圈半径的因素： 第五节 生物统计法测定抗生素效价----可靠性测验结果分析 （1）试品间（F1）：本项是用以观察S和T的结果是否是显著差别。 （2）回归（F2）：当P0.01时，证明实验的线性好。 （3）偏离平行（F3）：当回归项非常显著而偏离平行不显著时，则认为S和T呈平行直线关系。 （4）剂间（F4）：即不同剂量（浓度）所致的反应（抑菌圈直径或面积）应有明显差异。 （5）碟间（F5）：该项应不显著（P0.05）。 归纳如下： 试品间差异不显著（P0.05） 回归项非常显著（P0.01） 偏离平行不显著（P0.05） 剂间差异显著（P0.05） 碟间差异不显著（P0.05）。 第二节 抗生素类药物的鉴别 一、β-内酰胺类抗生素的鉴别 二、氨基糖苷类抗生素 链霉素呈色反应 1、茚三酮反应： 2、坂口反应（sagaguchi test)：链霉胍特有 3、糖类反应：莫利西反应(Molisch test) 4、埃尔松-摩根（Elson-Morgan test)： 5、麦芽酚反应(maltol test)： 三、四环类抗生素 四、大环内酯抗生素 五、利福霉素类抗生素 六、多肽类抗生素 第三节 抗生素类药物的杂质检查 1、青霉素 2、链霉素 3、土霉素 4、