使用UPLCXevoTQ-Smicro系统快速分析血清中25羟基-Waters.PDF

[ 应用纪要 ] 使用UPLC Xevo TQ-S micro系统快速分析血清中25羟基维生素D 李倩倩，栾萱，孙斌 沃特世科技(上海)有限公司 前言 维生素D(VD)对孩子的生长发育和成年人的骨骼及身体健康都具有非常重要的生理意义，然而中国有70%人群缺 乏VD。VD缺乏会导致多种疾病高发，例如：佝偻病、骨质疏松、肿瘤、心血管疾病、多发性硬化、糖尿病等。人们可 以通过食物、药物和晒太阳的方法来补充VD，但是VD并不是越多越好，补充过量也会中毒。VD包括VD2和VD3， 其功效不同，需要及时准确地检测，有针对地补充。VD2和VD3可以在人体肝脏中经25-羟化酶转变为25OH-VD2 和25OH-VD3，这两个标志物在体内含量多，稳定性较好，是评价体内VD水平的最佳临床指标，对于VD缺乏症的 诊断和补充治疗的监测非常重要。所以近年来，血液中25OH-VD的分析需求大大增加。免疫分析方法是早期VD 测定的主流方法，特异性低，容易与其它非目标化合物产生交叉反应，并且免疫分析法只能测定VD总量，无法区分 VD2与VD3。现在LC-MS/MS可以同时检测25OH-VD2和25OH-VD3的含量，相互之间没有干扰，已经成为测定 25OH-VD的金标准。 本应用方案使用Oasis PRiME HLB μElution 96孔固相萃取柱净化富集血清中25OH-VD2和25OH-VD3，用BEH C18色谱柱(2.1 x 50 mm, 1.7 µm)分离，经Xevo TQ-S micro三重四极杆质谱检测，可以实现血清中25OH-VD2和 25OH-VD3的高灵敏、高通量的快速定量分析。 仪器信息 ■■ 液相：ACQUITY UPLC I-Class BSM and SM-FTN ■■ 质谱：Xevo TQ-S micro 样品信息 表1：待测化合物的信息。 中文名称 英文简称 分子式 分子量 内标形式 25羟基维生素D2 25OH-VD2 C H O 412.33 d3 28 44 2 25羟基维生素D3 25OH-VD3 C H O 400.33 d3 27 44 2 CH3 HO CH3 CH3 HO CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 H CH3 H H H CH2 CH2 HO HO 25OH-VD2 25OH-VD3 图1 . 25OH-VD2和25OH-VD3的结构式。 1 实验条件 耗材信息 UPLC条件 中文名 型号 Waters货号 主要用途 UPLC系统： Waters ACQUITY UPLC I-Class