细菌感染的分子生物学检验实验.pptVIP

二、淋病奈瑟菌的分子生物学检验内容 （一）淋病奈瑟菌核酸的检测 1、PCR 是淋病奈瑟菌基因诊断中最基本的方法。PCR引物选择的靶基因多采用： ①隐蔽质粒ccpB基因(ccpBHO1/3、1/2及ccpBN3/4); ② 16SrRNA基因(SL67/59、NGP1/2)； ③porA假基因； ④编码外膜蛋白基因（omp基因）； ⑤opa基因； ⑥胞嘧啶DNA甲基转移酶基因。 2、实时荧光定量PCR技术 目前临床检测NG的主要的分子生物学技术。 3、连接酶链反应 用于LCR方法检测的NG靶基因主要有opa基因和Pilin基因。对咽拭子标本具有很好的敏感性，但应注意避免污染导致的假阳性抑制物所致的假阴性。 4、链替代扩增技术 特异性扩增NG染色体PivNg基因，然后用荧光标记的探针检测其相对应的DNA靶序列。 （二）淋病奈瑟菌的耐药性检测 1、淋病奈瑟菌的主要耐药基因 ⑴gyrA和parC基因： DNA 旋转酶是氟喹诺酮类药物作用的靶位，由 gyrA 和parC 基因编码， gyrA基因突变可导致酶结构的改变，阻止氟喹诺酮类药物进入靶位，引起耐药。 gyrA基因突变与淋球菌低水平和中度水平氟喹诺酮类药物耐药有关，而对氟喹诺酮类药物高水平耐药是gyrA和parC共同参与基因突变的结果， gyrA和parC 是氟喹诺酮耐药决定区（QRDR）中的两个重要基因。 (2)penA、pon