酶反应动力学与固定化酶.pptVIP

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  • 2019-08-04 发布于广东
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第三章 酶催化反应动力学(2学时) 主要内容: 酶催化反应动力学研究包括哪些内容 ? 1酶催化反应速率与酶活力的测定 酶活力是指酶催化某一化学反应的能力,其大小可以用在一定条件下该酶所催化的某一化学反应的反应速度(reaction velocity)来表示,酶活力的高低和化学反应的反应速度的大小两者呈线性关系。 1.1酶催化反应速率随时间的变化 酶催化的反应速度可用在单位时间内底物的减少量或者产物的增加量来表示。如图3-1所示的曲线图。 酶促反应速度随反应时间延长而降低。 引起酶促反应速度随反应时间延长而降低的原因? (1)底物浓度的降低、产物浓度增加从而加速了逆反应的进行; (2)产物对酶的抑制作用; (3)随着反应时间的延长引起酶的部分失活等。 1.2 酶活力的测定原理 酶蛋白的含量很低,很难直接测定其蛋白质的含量,且常与其他各种蛋白质混合存在,将其提纯耗时费力。故不能直接用重量或体积等指标来衡量。 1.3酶活力测定时需注意: (1)选择反应的最适温度,根据不同的底物和缓冲液选择反应的最适pH。 (2) 速度要快,取反应的初速度 (3) 底物浓度要足够大(一般在10Km以上) 使酶被底物饱和,以充分反映待测酶的活力 2 底物浓度对酶促反应速度的影响 2.1中间络合物学说 中间络合物学说最早是由Henri和Wurtz两位科学家提出的。 在1903年,Henri在

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