论文：小檗碱、黄连生物总碱对AChE抑制作用特征研究.doc

小檗碱、黄连生物总碱对AChE抑制作用特征研究 李渊 李昊坤 宋一骁 刘强 丁兵兵 丁虹* * 通讯作者：丁虹，女，1964，博士，教授，博导。主要研究方向：药理毒理学。Email:dinghong2000@263.net （武汉大学药学院 武汉 430072） [摘要]：目的：AchE抑制剂的筛选与探究；方法：通过薄层分析法展开样品，利用显色反应判断各样品对AchE的抑制作用；通过紫外法测定AchE酶解产物在单位时间的生成量判断各样品对AchE抑制作用的强弱；结果：小檗碱高剂量及黄连生物碱对AchE的抑制率很高，且黄连生物碱的抑制率接近100%；结论：小檗碱高剂量及黄连生物碱对AchE有较强的抑制作用。 [关键词]：AchE抑制剂 小檗碱 黄连生物碱 薄层分析法 紫外法 抑制率 Research into Berberine,and berberine alkaloids on the characteristics of AChE inhibition " Li Yuan Songyi Xiao Liu Qiang Ding Bingbing Li Haokun DING Hong * (College of Pharmacy, Wuhan University, Wuhan 430072)  [Abstract]: Objective: AchE inhibitor screening and exploration; Methods: Expand thin layer chromatography samples, using the samples to determine the color reaction of AchE inhibition; by AchE enzyme determination in the generation of the product in unit time the samples to determine the amount of the strength of AchE inhibition; results: high-dose berberine and berberine alkaloids on the high rate of AchE inhibition, and inhibition of berberine alkaloids close to 100%; Conclusion: The high-dose berberine and berberine alkaloids have a strong inhibitory effect on AchE. [Keywords]: AchE inhibitor, thin layer chromatography of berberine alkaloids berberine inhibition by UV method  据统计：美国AD患者为200-400万，全球1700-2500万，我国有关调查尚缺乏大系列、据最新城市普查结果，AD患病率高于血管性痴呆。在西方国家AD是继心脏病、肿瘤和中风之后，排在第四位的导致死亡的疾病。与AD相关的递质改变有 乙酰胆碱系统、单胺系统、氨基酸类和 神经肽递质，其中 胆碱乙酰转移酶和乙酰胆碱类递质的减少是AD的重要原因。临床上主要适用胆碱酯酶抑制药治疗AD. 黄连是一味具有广泛药效作用的中药,在国内外用于多种疾病的治疗,且新的药效又不断被发现。而黄连的有效成分为小檗碱，有文献报道小檗碱既有直接拮抗胆碱受体的作用,同时也可能通过抑制胆碱酯酶活性发挥其拟胆碱样作用。因此小檗碱有可能成为治疗AD的有效药物。利用通过紫外法测定AchE酶解产物在单位时间的生成量判断小檗碱对AchE抑制作用的强弱，结果发现小檗碱高剂量及黄连生物碱对AchE的抑制率很高，且黄连生物碱的抑制率接近100%；所以小檗碱高剂量及黄连生物碱对AchE有较强的抑制作用，有可能成为新的治疗AD的药物。 材料与方法 紫外法观察受试样品对AChE抑制作用 材料 1.1.1仪器与设备：移液器（200、1000μl）EP（1、10ml）、量筒（10ml）。 储液瓶、玻璃棒、50ml、100ml容量瓶、棕色储液缸（容量约100ml）、10mL、1.5mLEP管若干、微量石英比色皿、紫外分光光度计、恒温水浴锅、洗瓶、擦镜纸若干、500ml量筒、pH试纸、玻璃棒、废液缸、分析天平、称量纸若干、药匙 1.1.2原料与试剂：缓冲溶液A：pH8.0的Tris-HCl（50mM）、缓冲溶液B：150mL含BSA0.1%的溶液、缓冲溶液C、ATCI底物溶液、DTNB溶液、加兰他敏（用DMSO稀释成