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基于近红外光谱技术对硫磺熏蒸白芷定性鉴别与定量探究 ［收稿日期］2014-01-28 ［基金项目］人力资源和社会保障部留学人员科技活动 项目(人社厅函) ［通信作者］*巢志茂，研究员，Tel : (010)2869 , Fax ： ( 010 ), E-mail : chaozhimao@163. com ［作者简介］吴晓毅，博士研究生，E-mail : wuxiaoyi0000@126.com ［摘要］白芷中的香豆素类成分在硫磺熏蒸后显著下 降，因此需要对硫磺熏蒸的白芷建立快速定性鉴别，并建立 欧前胡素含量定量模型，实现药材质量控制的目的。该文使 用近红外(NIR)漫反射光谱技术采集硫磺熏蒸和非硫磺熏 蒸的白芷的NIR光谱，以一阶导数和矢量归一化的方法进行 预处理，采用OPUS/INDENT定性分析软件Ward s Algorithm 法进行聚类分析，在8 806.0?3 811. 0 cm-1的聚类分析结 果可以简单，快速地鉴别白芷是否被硫磺熏蒸。同时，以高 效液相色谱法测定的欧前胡素分析值为参照，结合 OPUS/QUANT定量分析软件偏最小二乘法，建立欧前胡素含量 的定量模型。该模型的相关系数(R2),内部交叉验证均方 差(RMSECV)和预测均方差(RMSEP)分别为0. 982 8, 0. 006 8和0.011 8o建立的欧前胡素NIR定量模型可准确地用于 快速测定白芷中欧前胡素的含量。 ［关键词］白芷；近红外光谱；硫磺熏蒸；聚类分析； 欧前胡素 中药白芷，为伞形科植物白芷Angelica dahurica (Fisch, ex Hoffm. ) Benth. et Hook. f.或杭白芷 A. dahurica (Fisch. ex Hoffm?) Benth? et Hook? f. var? formosana (Boiss. ) Shan et Yuan 的干燥根。性温味辛, 归胃、大肠、肺经，具有解表散寒、祛风止痛、宣通鼻窍、 燥湿止带、消肿排脓的功效，主要用于感冒头痛、眉棱骨痛、 鼻塞流涕、鼻渊、牙痛、带下、疮疡肿痛等［1］。白芷的传 统产地加工方法主要采用硫磺熏蒸法，可使药材快速干燥, 并解决药材颜色发黄和生虫等问题［2］。但近年来的研究表 明，白芷硫磺熏蒸后，其中的香豆素类成分及药效活性均显 著降低［3-7］ o因此，鉴别硫磺熏蒸样品，并完成白芷的质 量控制指标一一欧前胡素的含量测定对药材质量控制以及 用药规范有重要的意义。当前鉴别硫磺熏蒸药材及饮片的常 用检测方法有二氧化硫残留量测定法［8］、改良古蔡氏法 ［9］、碘滴定-氯化顿反应法［10］等，白芷中欧前胡素的含量 常用高效液相色谱法进行测定［1, 11］。这些鉴别和测定方 法都需要对样品进行损害性处理。近年来，近红外光谱(NIR) 技术因具有操作简便、分析速度快、对样品无损害、无化学 污染和可实现在线控制的优点，得到了迅速的发展和利用 [12],在药物定性和定量分析中受到了广泛重视和应用 [13-15] o本文将近红外技术与化学计量学相结合，采用聚 类分析法完成了硫磺熏蒸和非硫磺熏蒸白芷的分类；同时采 用偏最小二乘法建立欧前胡素定量分析模型，实现了白芷中 欧前胡素含量的快速、简便和准确测定。这些方便简捷、不 损害样品的NIR技术，对白芷具有快速的质量评价价值。 1材料 BRUKER MPA型傅里叶变换近红外光谱仪，配有漫反射 附件、样品旋转器和石英样品杯、PbS检测器、OPUS/INDENT 定性分析软件、OPUS/QUANT定量分析软件（德国BRUKER公 司）；岛津LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津公司）。 欧前胡素对照品（成都普思生物科技有限公司，批号 101228-01）,乙睛、甲醇（色谱纯，Merck公司），纯水（娃 哈哈纯净水），其他所用试剂均为分析纯。 2012年10月，从河北安国市15个自然村的29个地块 随机采挖白芷的根，除去泥土，晾干。每个地块选择大小一 致、无病虫害、无机械损伤的白芷6根。其中3根趁新鲜直 接切片后晾干，即为非硫磺熏蒸的自然阴干的白芷药材，编 号1NS至29NS；另3根进行了 48 h的硫磺熏蒸，直到出现” 淌泪”为止，即药材变软、表皮有少量液体渗出，达到传统 的硫磺熏蒸产地加工的基本要求，随后切片，晾干，即为硫 磺熏蒸后的白芷药材，编号为30S至58S,见表lo INS和 30S, 2NS和31S, 3NS和32S, ……以此类推，均为同一个 地块的新鲜白芷根的2种不同加工方法获得的实验样本。样 品经中国中医科学院中药研究所巢志茂研究员鉴定为伞形 科当归属植物白芷A. dahurica的根。 2方法 2. 1近红外光谱采集 取全部5