植物显微技术大总结绝版.docVIP

一、名词解释 1、染色体核型：指细胞染色体在光学显微镜下所有可测定的表型特征的总称。 2、染色体带型：借助细胞学的特殊处理程序，使染色体显现出深浅不同的染色带。染色体的数目、部位、宽窄和着色深浅均有相对稳定性，所以每一条染色体都有固定的分带模式，即染色体带型。 3、核仁形成区（NOR）：即核仁组成区或核仁组织者，是细胞中某一对或几对染色体上负责组织核仁的区域，含有指导rRNA合成的基因。 4、染色体基数：在系统发育范畴内，在整倍多倍体系列的属中，包含染色体数目最少的种的配子体染色体数目为该属的染色体基数。 5、细胞周期：增殖细胞的细胞周期是处于母细胞分裂后形成的细胞到下一次再分裂形成两个子细胞之间的时期。包含G1期，S期，G2期，M期四个阶段。 6、随体(SAT)：指在染色体的一端由微细的纤维结构连接起来的球形或椭圆形的染色颗粒 7、B染色体：B染色体又称副染色体、超数染色体或额外染色体。在一组基本染色体外，所含的多余染色体或染色体断片称为B染色体，它们的数目和大小变化很多。 8、A染色体：指真核细胞染色体组的任何正常染色体，包括常染色体和性染色体，它是相对于额外染色体—B染色体而言的。A染色体在遗传上是重要的，对个体的正常生活和繁殖是必需的。其数目的增减和结构的变化对机体会造成严重的后果。 9、端粒：是线状染色体末端的DNA重复序列，是真核染色体两臂末端由特定的DNA重复序列构成的结构，使正常染色体端部间不发生融合，保证每条染色体的完整性。 10、Ag-NOR技术:银染法。原理是由于转录的rDNA部分有丰富的酸性蛋白，它们具有S－H键和S－S键，容易将Ag+还原为Ag的颗粒，从而在活性的核仁形成区镀上银，呈现为黑色的区域。 分带技术：可以显示染色体内部结构分化的技术。 核型：体细胞染色体在光学显微镜下所有可测定的表型特征的总称。 混倍体：不同个体和不同细胞的染色体数目变异幅度较大，出现整倍和非整倍细胞的一系列变异，此为混倍体。 联会复合体（synaptonemal complex, SC)是减数分裂偶线期两条同源染色体之间形成的一种结构，主要由侧生组分、中间区和连接侧生组分与中间区的SC纤维组成，它与染色体的配对，交换和分离密切相关。 植物染色体分带类型：吉姆萨Giemsa带（分为C、N、G带）和荧光分带（分为Q、H、D、R、AO带） 基数（x）及倍性（n）：x表示个体发育，n表示配子体世代 核型表述：核型图、模式图、核型公式如：芍药2n=2x=10=6m+2sm+2st（SAT） 多倍体:个体恒定的均含有多倍体细胞时，称为多倍体。 单倍体：体细胞染色体数等于本物种配子染色体数的个体。 单价体:减数分裂时因没有同源染色体而不能联会的单条染色体。 二价体：在减数分裂中联会结果是没对同源染色体形成一个二价体 小染色体:是指其长度约在2微米以下而又不易分辨着丝点的染色体。 早期认为，染色体经碱（NaOH,Ba(OH)2）或酸HCL处理，可以使DNA分子的双拆开，叫做“变性”。以后在SSC盐溶液中温育，使单链的DNA分子又重新形成H键，恢复原来的双键结构，叫做“复性”。 染色体常规压片：是指显示染色体的一般形态和结构的技术。 解离酶:是一个应用较广泛的方法，是去壁低渗法制片的主要方法也可以用于压片法。一般用两种酶:一种是果胶酶，分解细胞之间的中层，使组织中的细胞分离；一种是纤维素酶，分解细胞壁，便于染色体自由散开。 植物染色体的实际长度（绝对长度）指经低温或药物处理后的分裂中期染色体变异于1~30um. 模式核型：从多数细胞分析所得的平均核型，它具有代表一个物种或一个品种或一个居群的植物的核型。球2n=20 二、目前国内外常用的植物染色体技术可分为哪两种？他们的优缺点?异同？ 目前国内外常用的制片技术可分为两种，即压片法和去壁低渗法。 优缺点比较: 压片法和趋避低渗法各有优缺点，前者操作快速简便，节省材料，后者操作稍繁且需酶制剂，但染色体易于展开而不易于导致染色体变形，尤其对一些含有较多成熟细胞的组织，如芽、愈伤组织等，其制片效果明显优于压片法。 压片法的流程： 1.取材 根尖、茎尖、幼叶及愈伤组织等。在植物染色体的研究中，根尖分生组织为最主要的材料。 2.预处理 用化学的或物理的方法对材料进行预先处理，阻止或破坏纺锤体形成，另一个作用是导致染色体高度浓缩，利于分散。 3.固定 用卡诺氏固定液固定2到24小时。 4.解离 将固定后的材料置于在预热60摄氏度的1N盐酸中。 5.染色 染色剂有洋红，卡宝品红等。 6.压片 去壁低渗火焰干燥技术，分两种方法。悬液法：取材——预处理——前低渗——酶解离——后低渗——制细胞悬液——固定、滴片——火焰干燥——Giemsa染色——镜检；涂片法：取材——预处理——前低渗——酶解离——后低渗——固定