复苏植物牛耳草引导蛋白基因的克隆与表达.pdf

　18 　10 　2008 10 1111 ＊学术论文 ＊ 复苏植物牛耳草引导蛋白基因的克隆与表达＊ 吴仁花　王丽丽　王　智　商海红　刘　霞　朱　燕　亓岽东　邓　馨＊＊ , , 100093 摘要　　复苏植物生长在干旱频繁发生的 殊生境中, 具有耐极端干旱的 性, 是 一种宝贵的耐 旱基因资源植物.前期实验从复苏植物牛耳草的叶片中得到一个干旱诱导的细胞壁蛋白基因片段, 在此基础上利用5′-RACE 获得全长cDNA, 命名为BhD I R1, 编码一个199 个氨基酸的小分子量 蛋白质, 与松柏等植物中发现的可能参与木质素合成的引导蛋白具有20%—40%的序列相似性. 表达分析表明BhD IR1 在复苏植物牛耳草干旱复水过程中mRNA 明显积累, 激素、 信号分子和温 度胁迫都可诱导其表达.BhDIR1 在N′端包含 一个外泌的信号肽, GF 融合蛋白的荧光定位分析 证实BhDIR1 定位于细胞膜和壁上.根据牛耳草干旱后酸溶木质素含量下降这一现象及以上结果可 推测, BhDIR1 可能通过调控木质素的单体间的连接方式而改变木质素的物理性质来影响细胞壁的 机械强度和柔韧性, 减少干旱对细胞造成的机械伤害. 关键词　　　　　　 [1] 　　, . . . Cra- ; terostigma wilmsii, My rothamnus f labellif olius “” Sp orobolus s tapf ianus , ; , 、 、, , [2, 3] ; , “”, . , . , , , ., .expansin 、 、 , [4] [5] LEA , .Neale S .stap - “” f ianus , . 1999 　2008-03-17 , 2008-04-23 　 ＊( 　＊＊, E-mail:deng @ 1112 　18 　10 　2008 10 [6—10] . Anchor primer-1:5′-GGCCACGCGTCGACTAG- (Boea hy grometrica TAC (G )14 -3′ R-2:5′-CTC- (Bunge)R Br.), CAAGTCCGAGAAGGCTCCGAA-3′ , ; B hD IR1 5′cDNA .95 ℃5min, — 94 ℃30 s, 55 ℃30 s, 72 ℃1min, 35 , [8] ; 72 ℃10min. CR [9] ; . 35%, 5% 1.3 　克隆、 测序与序列分析 , 8 、 CR 1.2%, [10] . () [11] . pBS , , DH5-α, CR [12]