双向电泳结合MDLC-MSMS法分析阿替洛尔对映异构体作用后的血管平滑肌细胞差异表达蛋白.docVIP

双向电泳结合MDLC-MS/MS法分析阿替洛尔对映异构体作用后的血管平滑肌细胞差异表达蛋白 邱峰1,陈世知2, 郑姣妮23, 邱宗荫23（400016重庆，1重庆医科大学附属第一医院 药剂科什么科室？1； 400016重庆,2 重庆医科大学附属第二医院检验科, 3重庆医科大学药学院2），重庆400016） [摘要]：目的 以双向电泳结合多维色谱串联质谱策略，分析阿替洛尔对映异构体（(R)/(S)-ATN）作用于血管平滑肌细胞（VSMCs）后的差异表达蛋白质。方法 以(R)/(S)-ATN分别作用于VSMCs，提取总蛋白质，双向电泳分离差异表达蛋白点，二维纳流液相色谱芯片（HPLC-CHIP，包含一支纳升级Zorbax 300SB-C18富集柱和一支纳升级Zorbax 300SB-C18分析柱）富集、分离差异表达蛋白酶解后的肽混合物，线性离子阱质谱进行在线分析，Spectrum Mill MS Proteomics Workbench自动分析MS和MS/MS数据，通过UniProt KB / SWISS-PORT数据库进行搜索。结果 经与(R)-ATN干预VSMCs后的蛋白质组进行比较、筛选，(S)-ATN干预VSMCs后的蛋白质组中有6个蛋白质点表达上调。筛选获得了6种可能的差异表达蛋白，其中5种蛋白质与可能心血管功能有关：CrK相关底物蛋白、接头蛋白-3复合物?-1亚基与