生物化学第三章 核酸化学.ppt

第三章核酸化学 核酸是一类重要的生物大分子，担负着生命信息的储存与传递。 核酸是现代生物化学、分子生物学的重要研究领域，是基因工程操作的核心分子。 第一节 核酸是遗传物质的载体 一、核酸的研究发现史 1868年，F. Miescher从细胞核中分离得到一种酸性物质，即现在被称为核酸的物质。 1944年，Avery的转换转化实验 1952年， Hexshey、Chase T2噬菌体（捣碎器实验） 1953年，Watson、Crick DNA双螺旋模型 核酶（Ribozyme） 98％核中（染色体中） 真核 线粒体（mDNA） 核外 叶绿体（ctDNA） DNA 拟核 原核 核外：质粒（plasmid） 病毒：DNA病毒 RNA主要存在于细胞质中 第二节 核酸的基本化学组成 一、戊糖 四、核苷酸（nucleotide） 核苷酸 核苷+磷酸  戊糖+碱基+磷酸 五、核苷酸衍生物 1. 继续磷酸化 2.环化磷酸化 3. 肌苷酸及鸟苷酸(强力味精) 六、多聚核苷酸（核酸） 多聚核苷酸是通过一个核苷酸的C3’-OH 与另一分子核苷酸的5’-磷酸基形成3’,5’-磷酸二酯键相连而成的链状聚合物。 第三节 DNA的结构 一、DNA的一级结构 脱氧核糖核酸的排列顺序 可以用碱基排列顺序表示 连接键：3’，5’-磷酸二酯键 磷酸与戊糖顺序相连形成主链骨架 碱基形成侧链 多核苷酸链均有5’-末端和3’-末端 DNA的碱基顺序本身就是遗传信息存储的分子形式。生物界物种的多样性即寓于DNA分子中四种核苷酸千变万化的不同排列组合之中。 二、DNA的三级结构 DNA双螺旋的进一步扭曲构成三级结构，负超螺旋 原核 双链环状DNA（dcDNA） 病毒 单链环状DNA（scDNA） 单链线性DNA（ssDNA） 三、rRNA 三、核酸的变性、复性与分子杂交 1. 变性 稳定核酸双螺旋次级键断裂，空间结构破坏，变成单链结构的过程。核酸的的一级结构(碱基顺序)保持不变。 变性表征 生物活性部分丧失、粘度下降、浮力密度升高、紫外吸收增加（增色效应） 变性因素 pH（11.3或5.0） 变性剂（脲、甲酰胺、甲醛） 低离子强度 加热 本 章 小 结 核酸是遗传物质载体的证明和研究历史 核酸的化学结构：戊糖、碱基（A、T、G、C、U），核苷、核苷酸及其衍生物的结构特点（原子编号） DNA的结构：一级结构（核酸序列及其表示、基因及基因组、序列测定）、二级结构（ Watson －Crick双螺旋模型、Z－DNA）、结构维持的化学键 RNA结构与功能：碱基组成特点、RNA的种类结构及功能 核酸的性质：酸碱性、变性与复性、分子杂交 真核 双链线性DNA（dsDNA） 第四节 RNA的结构与功能 一、结构特点 碱基组成 A、G、C、U （A＝U/G≡C） 稀有碱基较多，稳定性较差，易水解 多为单链结构，少数局部形成螺旋 分子较小 分类 mRNA（hnRNA 核不均一RNA） tRNA rRNA （snRNA/asRNA） 少数RNA病毒 二、tRNA 占RNA总量的15％ 一种氨基酸对应最少一种RNA 分子量25000左右，大约由70－90个核苷酸组成，沉降系数为4S左右。 分子中含有较多的修饰成分。 3-末端都具有CpCpAOH的结构。 tRNA的三级结构 占RNA总量的80％ 18s 5s、5.8s、28s 40s 80s 50s 16s 5s 、23s 30s 70s 50s rRNA 核糖体 rRNA 核糖体 真核生物 原核生物 四、mRNA和hnRNA 占细胞总RNA的3％～5％ 真核细胞mRNA的3‘-末端有一段长达200个核苷酸左右的聚腺苷酸(polyA)，称为 “尾结构” ，5’ -末端有一个甲基化的鸟苷酸，称为” 帽结构“ 。 五、snRNA （small nucleic RNA 核小RNA） scRNA （small cytoplasmic RNA） asRNA （antisense RNA） 第五节 核酸的性质 一、一般的理化性质 两性解离 / 一般呈酸性（在中性溶液中带负电荷），微 溶于水，不溶于有机溶