猪肝羧酸酯酶#基因的克隆和在原核细胞中的功能性表达-畜牧兽医学报.pdf

畜牧兽医学报 猪肝羧酸酯酶 基因的克隆和在原核细胞中 的功能性表达 肖启玲 李朋辉 闫秉芳 杨 路 王喜亮 肖运才 李自力 刘 梅 毕丁仁 石德时 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉 华中农业大学动物医学院农业部兽用诊断制剂创制重点实验室武汉 罗德岛大学生物医学科学系药物基因组学与分子治疗中心金士顿 美国 摘 要为获得有活性的猪肝羧酸酯酶 并研究其功能利用 与常规 方法从大白猪肝组织 中扩增 基因的 将 的 序列连接到 原核表达载体在 中与 质粒共诱导表达纯化目的蛋白质并检测其酶活性测序结果表明克隆到 基因编码区全长 的片 段该片段编码 个氨基酸 和 结果显示 融合蛋白质成功表达在 的 培养温度下 诱导 后 重组蛋白质表达量最高且大部分以可溶性形式存在酶活性试验结果表 明 融合蛋白质水解底物 的酶活力为 研究结果不仅为研究 水解兽药特性提供高纯度 的具有原有酶活性的重组蛋白质也为 同工酶家族其他重要成员的活性功能研究提供理论