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粗分离——透析(去除小分子杂质) ? 纯化——凝胶色谱法进行分离和纯化 ? 纯度鉴定——SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定相对分子 质量 C 【解析】血红蛋白是有色蛋白,因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液。凝胶色谱法分离蛋白质的原理是相对分子质量较大的蛋白质在凝胶颗粒的间隙移动,路程短,移动速度较快;相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢。C错误,血红蛋白的释放应加入的是蒸馏水和甲苯。 跟踪训练2 在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实 验中,相关叙述正确的是( ) A.用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L,滤去析出物 B.调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质 C.将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色 D.用菜花代替鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同 B 【解析】A项,当NaCl溶液浓度被调至0.14 mol/L时,DNA在其中的溶解度最小,会大量析出,此时应滤取——而不是滤去析出物;B项,利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中会溶解或析出的特点,可以除去蛋白质等杂质,而选用木瓜蛋白酶,则可借助酶作用的特异性,水解蛋白质,进而达到除杂的效果;C项,描述中缺少沸水浴加热,不会立即呈现颜色变化;D项,如果实验材料是植物细胞,需要加入洗涤剂和食盐研磨。 完成作业:专题八 第2讲 本部分内容讲解结束 按ESC键退出全屏播放 专题八 生物技术实践 栏目导引 网格构建 知识自填 核心考点 重难突破 第2讲 生物技术在其他方面的应用 考纲要求 三年考情 命题趋势 (1)酶的存在与简单制作方法 (2)酶活力测定的一般原理和方法 (3)酶在食品制造和洗涤等方面的应用 (4)制备和应用固定化酶 2013海南、江苏 2012广东、江苏 2011江苏 1.趋势分析:联系果汁生产、加酶洗衣粉等生产生活实例,考查酶特性探究的实验分析与设计,植物组织培养的操作程序。 2.备考指南:(1)利用实例分析法,理解果胶酶在果汁生产中的作用。 (2)利用列表比较法突破直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的内容。 (3)联系生长素和细胞分裂素的作用分析两者在植物组织培养中的作用。 (1)植物的组织培养 (2)蛋白质的提取和分离 (3)DNA的粗提取和鉴定 (4)PCR技术的基本操作和应用 2012江苏、山东 2011广东、江苏、上海 纤维素和果胶 温度、pH、酶的抑制剂 蛋白酶、脂肪酶 通洗衣粉与加酶洗衣粉 一类化学反应 细胞的全能性 脱分化和再分化 pH、温度、光照 蛋白质的各种特性 凝胶色谱法和电泳法 DNA热变性 变性→复性→延伸 1.固定化细胞在使用上有什么要求? 因为固定化细胞使用的是活细胞,因而要定期提供全面的营养物质,供细胞生长、繁殖。 2.凝胶色谱法的原理是什么? 根据相对分子质量的大小分离蛋白质。 考点一 酶的应用 (2013·高考江苏卷)下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是( ) A.可用包埋法制备固定化酵母细胞 B.反应产物对固定化酶的活性没有影响 C.葡萄糖异构酶固定前后专一性不同 D.固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应 [自主尝试] ________ 【解析】体积大的细胞难以被吸附或结合,固定化细胞多采用包埋法,A项正确;反应产物积累会影响酶的活性,B项错误;葡萄糖异构酶在固定前后都是催化葡萄糖转化成果糖,故专一性相同,C项错误;固定化细胞固定的是一系列的酶,可以催化一系列的反应,但不是催化各种反应底物的反应,D项错误。 【答案】A 【链接提升】 1.酶活性不等同于酶促反应速度 同等条件下的酶促反应速度的快慢可以表示酶活性的高低,但酶活性与酶促反应速度仍然是两个完全不同的概念,其影响因素也不完全相同,如酶的浓度、反应物的浓度可以影响反应速度,但不能影响酶的活性。 2.海藻酸钠溶液的浓度对包埋酵母细胞数量的影响 (1)海藻酸钠溶液浓度过高,将很难形成凝胶珠; (2)浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少。 3.配制海藻酸钠溶液的注意事项 (1)海藻酸钠溶化时要用小火或间断加热,避免海藻酸钠发生焦煳; (2)将溶化后的海藻酸钠先冷却至室温,再与酵母细胞混合,避免高温杀死酵母细胞; (3)固定化酵母细胞时,应将海藻酸钠与酵母细胞的混合液用注射器缓慢滴加到CaCl2溶液中,而不是注射,以免影响凝胶珠的形成。 跟踪训练 果胶酶主要用于果胶的分解,在果汁的生产等方面被广泛应用。 (1)霉菌发酵生产的果胶酶是食品加工业中使用量最大的酶制剂。某科研小组为了筛选出果胶酶的高产菌株,进行了相关实验。 第一步:取样。如
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