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胡萝卜素的柱层析分离西安医学院生物化学与分子生物学教研室学习层析法在生物化学中的应用掌握胡萝卜素柱层析法分离的实验原理及操作步骤实验目的胡萝卜素维生素原胡萝卜素存在于辣椒和胡萝卜等黄绿色植物中因其在动物体内可转变成维生素故称为维生素原各种胡萝卜素的化学结构不同它们被氧化铝吸附的强度以及有机溶剂中溶解度都不同实验原理层析法层析法两个相固定相流动相分类吸附层析分配层析离子交换层析凝胶层析和亲和层析法等吸附层析可根据操作形式的不同分为柱层析和薄板层析等操作步骤一提取制备色素提取液研磨干红椒剪碎研磨加的
胡萝卜素的柱层析分离? 西安医学院 生物化学与分子生物学教研室 学习层析法在生物化学中的应用。 掌握胡萝卜素柱层析法分离的实验原理 及操作步骤。 实验目的: 1. 胡萝卜素(维生素A原) 胡萝卜素存在于辣椒和胡萝卜等黄绿色植物 中,因其在动物体内可转变成维生素A,故称为 维生素A原。 各种胡萝卜素的化学结构不同,它们被氧化 铝吸附的强度以及有机溶剂中溶解度都不同。 实验原理: 2. 层析法 层析法两个相:固定相、流动相。 分类:吸附层析、分配层析、离子交换层 析、凝胶层析和亲和层析法等。 吸附层析可根据操作形式的不同分为柱层 析和薄板层析等。 操作步骤: 一、提取 1.制备色素提取液 研磨:5-6g干红椒剪碎、研磨,加4ml 95%的乙醇,继续研磨数下,加入石 油醚6ml迅速研磨数下,三层纱布过滤。 除乙醇:分液漏斗中将过滤好的色素提 取液与10ml蒸馏水混合,静置分层,弃下 层水相,重复洗2-3次,至“水相透明”。 除水:塑料试管中,加入小半匙无水硫酸钠,再加入 除完乙醇的色素提取液。 二、层析柱制作 三、层析 1.石油醚2ml 2.提取液1ml 3.丙酮石油醚冲洗 “不断流” 四、观察结果 色带位置、宽度、颜色 操作注意事项: 1.有机溶剂及Al2O3安全操作使用。 2.层析柱用完不能水洗,直接将Al2O3倒出在 报纸上。 3.固体垃圾(辣椒皮及残渣、塑料试管、滤 纸片等倒入垃圾桶,避免堵塞下水道。
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