原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
2013级五年制本科生 免疫学实验课 试管凝集—测定血型抗体效价 双向免疫扩散 实验内容 抗原抗体反应分类 凝集反应 琼脂沉淀反应 中和反应 补体结合反应 环状法 絮状法 沉淀反应 单向免疫扩散、双向免疫扩散 对流免疫电泳、火箭电泳 免疫电泳 反应分类 实验原理: 在试管中，颗粒性抗原与相应抗体在有适量电解质存在时，直接结合可形成肉眼可见的凝集块。 试管凝集—测定血型抗体效价 实验目的 利用凝集试验判断抗体的效价 效价：也称滴度，它的表示法与抗体的稀释倍数有关，一般以该抗体能与其对应的抗原发生可见反应的最高稀释度来表示。 实验材料 名称 量/组 生理盐水 20ml 0.5%压积血（RBC） 8ml 抗体 0.5ml 1ml刻度吸管 2支 5ml刻度吸管 2支 小试管 28支 (7支/人) 试管架 1个 37℃孵箱 1个/室 记号笔 1只 实验以个人为单位，物品四个人一组 实验步骤 抗体倍比稀释（稀释方法见后）。 稀释好的试管中各加入红细胞0.5ml。 加样后摇动试管，使红细胞与血清充分混合。 37℃ 孵育90mins后进行结果观察。 试管号 1 2 3 4 5 6 7 抗体(血清) 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml - 抗原(红细胞) 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 血清稀释度 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 - 抗体(血清)倍比稀释方法 取7只抗体稀释管，编号。 第1只试管加入0.9ml生理盐水，第2-7只管中加入0.5ml生理盐水。 取0.1ml血清加入第1管中，混匀后取出0.5ml加入第2管，依此类推，第6管混匀后弃掉0.5ml。 第7管为阴性对照，不加抗体（血清）。 0.5ml 生理盐水 1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 - 血清 原液 0.1 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 1 2 3 4 5 6 7 弃掉 操作前清点好实验物品、器材。 吸抗体与红细胞的加样器头不能混用。 观察结果时不要摇动试管。 注 意 事 项 凝集程度判定： 4＋：红细胞全部凝集，上清澄清，晃动时凝集物成片状分散 3＋：红细胞绝大部分凝集，上清较澄清 2＋，红细胞半数凝集，上清略澄清 ＋，红细胞少数凝集，肉眼可见小凝块 ±，红细胞极少数凝集，显微镜下可见凝集 －：无凝集，红细胞在管底成界限清楚的小圆点 阴性对照：第7管（无抗体）为阴性对照 血型抗体效价的判定： 肉眼可见凝集（＋）时血清的最高稀释度为血型抗体的效价 结果判定方法 预期实验结果 双向免疫扩散实验 双向免疫扩散 双向免疫扩散的应用 抗体效价的判定 检测体液中各种蛋白成分 实 验 材 料 试剂： 1.5%琼脂 300ml/room 抗OVA抗体 1份/组 BSA 1份/组 抗原(0.1mg/ml OVA) 1份/组 器材： 5ml刻度吸管 1支/组 20?l pipette 1把 Tip (小) 若干 1.5ml EP管 10个 培养箱37℃ 1个/室 湿盒 1个/室 打孔器 1个 打孔纸样 1个
文档评论（0）