遗传规律学细菌和噬菌体重组和连锁.pptVIP

第七章 细菌与噬菌体的重组和连锁 第一节 细菌和病毒在遗传学研究中的地位 第二节 细菌的遗传分析 第三节 噬菌体的遗传分析 第一节 细菌和病毒在遗传学研究中的地位 作为遗传学研究对象的细菌和病毒 细菌和病毒是遗传学研究的好材料 病毒： 不是细胞，是比细胞更单纯的一种生命形式，不能单独生长和增殖。 病毒结构：蛋白质外壳+包被在内的核酸。 按寄主分类：动物病毒、植物病毒、细菌病毒（噬菌体）等。 遗传物质：单倍体，只有一条染色体，单一的核酸分子（基因带）。DNA或RNA。 第二节 细菌的遗传分析 细菌的杂交 F因子 高频重组 用中断杂交技术作连锁图 大肠杆菌的染色体呈环形 F因子整合到细菌染色体的过程 细菌的交换过程 重组作图 性导 三种不同的致育因子的相互关系 转化（transformation） 概念：指某些细菌通过其细胞膜摄取周围供体的染色体片段，将此外源DNA片段通过重组整合到自己染色体组的过程 1928年，阿委瑞（Avery O. T.）在肺炎双球菌中发现转化现象。 1944年，格里费斯（Griffith F.）成功地进行了肺炎双球菌转化试验，证实遗传物质是DNA，转化是细菌交换基因的方法之一。 转化条件：细菌要活跃地摄取外源DNA分子，则必须具备重组程序所必需的酶。 转化三种细菌：肺炎双球菌、枯草杆菌、流感嗜血杆菌都可用作转化细菌。 1、供体和受体的互作 （1）转化片段的大小 肺炎双球菌转化：DNA片段至少有800个碱基对； 枯草杆菌转化：DNA片段至少有16000个碱基对； （2）供体DNA分子存在的数目。对特定基因来说，供体DNA分子数目与成功转化有关。 （3）受体的生理状态 感受态是指细胞处于刚刚停止DNA合成，而蛋白质合成继续活跃进行时的状态。 活跃合成的蛋白质可使细胞膜易于接受转化DNA。只有感受态受体细胞才能摄取并转化外源DNA，而这种感受态只能发生在细胞生长周期的某一阶段。 黎德伯格Lederberg,塔特姆Tatum1946年P214图7-1 F因子 (F factor或F element） 例Hayes大肠杆菌实验（P216） 菌株A × 菌株B Met- thr+ leu+thi+ Met+ thr- leu- thi- 用链霉素处理菌株A或菌株B ，但这种处理不杀死它们，只是阻碍它们的分裂。结果： 处理过的菌株B ×未处理的菌株A-----在培养基上无活下来。 处理过的菌株A ×未处理的菌株B----在培养基上有活下来，且频率跟未经处理的对照组一样。 Hayes大肠杆菌实验解释 大肠杆菌中遗传物质的交换不是交互的。 菌株B为受体，菌株A是供体(有F因子)，供体经链霉素处理后不能分裂，但仍能转移基因（ F因子），而受体未被处理，当然仍能分裂，所以，接受转移过来的基因（ F因子）后，可在培养基上形成菌落。所以， 处理过的菌株B ×未处理的菌株A-----在培养基上无活下来。 处理过的菌株A ×未处理的菌株B----在培养基上有活下来，且频率跟未经处理的对照组一样 用中断杂交技术作连锁图 20世纪50年代， 沃尔曼（Wollman）和雅科（ Jacob ）中断杂交试验，其目的是：Hfr细菌在交配中，什么时候把基因转移给F- 细菌的。结果发现接合时的遗传物质转移是直线进行的。 Wollman和Jacob实验 Hfr thr+leu+azjrtonrlac+gal+strs × F- thr-leu-azjstonslac-gal-strr （P219表7-1） 总结 1、重组体中各标记基因进入F-细胞中时间不同，达到最高水平的时间也不同。 2、随时间的推迟，某个基因的重组率增加；一定程度后，重组率便不再增加。 如：10分钟时，tonr首次出现，15分钟时40%，25分钟80%， 所以，Hfr细菌的基因是按一定线性顺序依次地进入在F- 细菌。 3、以基因出现的时间为标准----作出大肠杆菌的遗传连锁图。 4、用一种大肠杆菌的不同Hfr菌株进行中断杂交试验，作出连锁图，其基因向F- 细菌转移的顺序不同。 因为基因是在染色体上，也就是说Hfr细菌的基因的转移是从染色体的一端（原点或O）开始，以线性方式进入F- 细胞中，基因离开原点愈远，进入F- 细胞愈迟。离开原点较远的基因，可能在转移过程停止以前，仍未转移，因而斜率较低，达到的高峰值也较小。 Wollman和Jacob发现F因子最后转移到受体，并使它们成为供体，但效率较低，是线性染色体的最后一个单位。 O azi ton lac gal